含钆纳米造影剂的磁共振影像分析及生物学评价

新型含钆纳米造影剂的磁共振影像分析及生物学评价

姓名：张永裕申请学位级别：硕士专业：影像医学与核医学

指导教师：李立20100603

中山大学硕士学位论文新型含钆纳米造影剂的磁共振影像分析及生物学评价专业：影像医学与核医学研究生：张永裕指导教师：李立教授中文摘要目的研制一种新型顺磁性高的含钆纳米材料介孔二氧化硅钆掺合纳米颗粒（Ｇｄ－ＭＣＭ．４１），观察其对小鼠的急性毒性作用、小鼠体内分布特点及进行磁共振影像分析，为进一步研究其长期毒性及评估其应用于影像学诊断的可行性提供依据。材料与方法采用新型纳米制各技术，将金属Ｇｄ掺合到介孔二氧化硅（ＭＣＭ．４１），制备含钆纳米材料Ｇｄ．ＭＣＭ．４１，透射电镜观察该纳米材料表征；ｘ．射线能谱仪测量复合材料内的钆含量；Ｘ射线衍射仪测试颗粒的介孔结构和物相结构；Ｏ．５Ｔ核磁共振分析仪测定该材料的纵向弛豫率ｒｌ、横向弛豫率ｒ２；１．５Ｔ磁共振成像系统观察其体外成像效果及其在Ｂａｌｂ／ｃ裸鼠和鼻咽癌ＣＮＥ．２裸鼠移植瘤体内的成像特征。以昆明种小鼠为实验动物，通过单次尾静脉注射含钆纳米材料悬浮液（５８．７ｌ～９９．４３ｍｇ／ｋｇ）进行急性毒性实验以评价其安全性，给药后饲养１４ｄ，观察饲养期间小鼠的一般情况，记录动物死亡情况，将死亡动物解剖，对动物主要脏器进行病理组织学检查，观察其病理学改变。利用免疫组织化学ＳＰ法对给药组与对照组小鼠肝脏库否细胞进行染色观察。电镜观察纳米颗粒在小鼠器官与肿瘤组织中的分布。中山大学硕士学位论文结果制备的含钆纳米颗粒呈圆球形，粒径约８０～１５０ｎｍ，平均粒径１２０ｎｍ。Ｘ射线能谱仪测量该复合材料内的钆含量约１１１．９９／ｋｇ。Ｘ射线衍射仪检测Ｇｄ．ＭＣＭ．４１呈六方有序孔道结构。核磁共振分析仪测定的加入分散剂Ｔｗｅｅｎ分散后的Ｇｄ．ＭＣＭ．４１在Ｏ．５Ｔ的纵向弛豫率ｒｌ、横向弛豫率１＂２分别为７．４５ｍＭ。１ｓ～、１０．９７ｍＭ’１ｓ一，显著高于常规造影剂Ｇｄ．ＤＴＰＡ（ｒｌ，４．２７ｍＭ‘１ｓ～；ｒ２，４．９９ｍＭ‘１Ｓ‘１）。含钆纳米造影剂静脉注射后，血管和肝脏观察到较明显强化，并且鼻咽癌ＣＮＥ．２裸鼠移植瘤在ＭＲ图像上呈较明显强化。小鼠含钆纳米材料ＬＤ５０及９５％可信限为７２．７（６８．９－－－７６．７）ｍｇ／ｋｇ，由组织学检查推测实验动物的死亡原因是由纳米颗粒在体内团聚，引起急性血管栓塞所致。肝脏库否细胞染色结果，给药组与对照组ＣＤ６８阳性表达的细胞数目及形态未见明显变化。组织电镜观察纳米颗粒主要分布在肝、脾、肺、肿瘤组织。结论本研究成功地制备了介孔二氧化硅钆掺杂纳米材料，该材料具有较高的弛豫率和较佳的生物相容性，为进一步研究和应用于影像诊断奠定了基础。由组织学检查结果推测小鼠的死亡原因是由血管栓塞所致，其长期毒性有待进一步观察。关键词：磁共振成像；造影剂；钆；纳米；急性毒性ｎ中山大学硕士学位论文ＴｈｅＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＡｓｓｅｓｓｍｅｎｔｏｆＧａｄｏｌｉｎｉｕｍ—ｄｏｐｅｄＭＣＭ－４１ｎａｎｏｐａｒｔｉｅ！ｅｓａｓＰｏｔｅｎｔｉａｌＭＲＩＣｏｎｔｒａｓｔＡｇｅｎｔｓＭａｊｏｒ：ＭｅｄｉｃｉｎｅＩｍａｇｉｎｇａｎｄＮｕｃｌｅａｒＭｅｄｉｃｉｎｅＮａｍｅ：ＺＨＡＮＧＹｏｎｇ－ｙｕＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＬＩＬｉＡＢＳＴＲＡＣＴｏｂｊｅｃｔｉｖｅＴｈｉｓｓｔｕｄｙａｉｍｔｏｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅａｎｅｗｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇＭＣＭ一４１ｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓｍａｔｅｒｉａｌ（Ｇｄ－ＭＣＭ－４１）ａｎｄｍｉｃｅ，ａｎｄｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅａｓｓｅｓｓｉｔｓａｃｕｔｅｔｏｘｉｃｉｔｙａｎｄｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｉｎｏｆｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓＧｄ·ＭＣＭ·４１ａｓａｎｅｗｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅＭＩＵｃｏｎｔｒａｓｔａｇｅｎｔ．ＭａｔｅｒｉａｌｓａｎｄＭｅｔｈｏｄｓＭＣＭ－４１ｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓＡｎｅｗｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｍａｔｅｒｉａｌ（Ｇｄ—ＭＣＭ－４１）ｈａｄｂｅｅｎｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄｖｉａｏｎｅ－ｓｔｅｐｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．ＧａｄｏｌｉｎｉｕｍＷａｓｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄｉｎｔｏｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓｓｉｌｉｃａｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ（ＭＣＭ－４１）ｔｏｐｒｅｐａｒｅＧｄ·ＭＣＭ一４１．Ｔｈｅｓｕｐｅｒｆｉｃｉａｌｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＧｄｌｏａｄｉｎｇａｎｄｍａｇｎｅｔｉｃｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｏｆｔｈｅＧｄ—ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｈｉｇｈ－ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎｅｌｅｃｔｒｏｎｒｎｉｃｒｏｇｒａｐｈｓ，ｅｎｅｒｇｙｄｉｓｐｅｒｓｉｖｅＸ－ｒａｙｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ，Ｘ－ｒａｙｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎａｎｄＯ．５ＴＮＭＲａｎａｌｙｚｅｒ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＴｈｅｉｍａｇｅｃｏｎｔｒａｓｔｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔｏｆｔｈｅｓｅｎａｎｏｓｉｚｅｄｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｎＢａｌｂ／ｃｎｕｄｅｍｉｃｅａｎｄｎａｓｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌａｎａｌｙｚｅｄｕｓｉｎｇａｃａｒｃｉｎｏｍａ（ＮＰＣ）ｘｅｎｏｇｒａｆｉｅｄＭＲｓｃａｎｎｅｒ．ＴｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅＣＮＥ一２ｔｕｍｏｒｓｗｅｒｅｉｎｖｉｖｏａ１．５Ｔｃｌｉｎｉｃａｌｔｈｅｔｏｘｉｃｉｔｙ，ｔｈｅＧｄ·－ＭＣＭ－－４１ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｗｅｒｅｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓｌｙａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄｉｎｄｏｓｅｄｅｐｅｎｄｅｎｔ（５８．７ｌｏｒｇａｎｓｔｏ９９．４３ｍｇ／ｌ（ｇ）ｍａｎｎｅｒａｎｄｔｈｅｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙｏｆｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ－ｔｒｅａｔｅｄｖｉｔａｌｗｅｒｅｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ．ＴｈｅｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｏｒｔｈｅＫｕｐｆｆｅｒｃｅｌｌｓｉｎｌｉｖｅｒ．ＴｈｅｏｒｇａｎｓｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄａｔｔｈｅｎａｎｏｍｅｔｅｒｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｅｖｅｌｕｓｉｎｇＩＩＩ中山大学硕士学位论文ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎｅｌｅｃｔｒｏｎｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｇｌｏｂｕｌａｒ－ｓｈａｐｅｄＧｄ－－ＭＣＭ··４１ｍｅａｎｏｆ１２０ｐａｔｔｅｒｎｓａｎｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓａｗｅｒｅａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ８０—１５０１１１．９９／ｋｇ．Ｘ－ｒａｙｎｎｌ（ａｎｎｌ）ｉｎｄｉａｍｅｔｅｒ，ｗｉｔｈａｌｌＧｄ—ｌｏａｄｉｎｇｏｆｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎｈａｄｓｈｏｗｅｄｏｒｄｅｒｅｄｒｌｐｏｒｅｏｆａｎｄＧｄ．ＭＣＭ．４１．Ｔｈｅｐａｒｔｉｃｌｅｓｔｒａｎｓｖｅｒｓｅｌｏｎｇｉｔｕｄｉｎａｌｒｅｌａｘｉｖｉｔｙｏｆ７．４５ｍＭ－１ｓ－１ｒｅｌａｘｉｖｉｔｙ１＂２ｏｆ１０．９７ｒａＭ－１ｓ－１ａｔ０．５Ｔｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｗｈｉｃｈｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｏｆｔｈｅｃｏｎｔｒａｓｔａｇｅｎｔ４．９９Ｇｄ．ＤＴＰＡ（ｒｌ，４．２７ｍＭ－１ｓ－１：ｒ２，ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｍＭ－卜Ｓ‘）．Ａｆｔｅｒｔａｉｌｖｅｉｎｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｉｎｂｌｏｏｄｖｅｓｓｅｌｓ，ｌｉｖｅｒａｎｄＮＰＣＣＮＥ－２ｘｅｎｏｇｒａｆｆｅｄｔｕｍｏｒｓ．Ｉｎａｃｕｔｅｔｏｘｉｃｉｔｙｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｗｉｔｈｍｉｃｅ，ｔｈｅｍｅｄｉａｎｌｅｔｈａｌｄｏｓｅ（ＬＤｓｏ）ｏｆＧｄ—ＭＣＭ－４１Ｔｈｅｗａｓ７２．７ｍｇ／ｋｇ．ａｎｄｔｈｅ９５％ｃｏｎｆｉｄｅｎｃｅｌｉｍｉｔＷａＳ６８．９～７６．７ｍｇ／ｋｇ．ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ·ｔｒｅａｔｅｄｖｉｔａｌｏｒｇａｎｓｉｍｐｌｉｅｄｔｈａｔｏｆｄｅａｔｈｏｆｍｉｃｅｂｅｄｕｅｔｏａｃｕｔｅｖａｓｃｕｌａｒｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓｂｙｎｏｔｈｅｃａｕｓｅｔｈｅａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎｏｆａｎｄｓｈａｐｅｏｆｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｎｖｉｖｏ．ＴｈｅｒｅｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｅｎｕｍｂｅｒＫｕｐｆｆｅｒｃｅｌｌｓｂｅｔｗｅｅｎｔｒｅａｔｍｅｎｔａｎｄｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｓ．ＴｈｅａｎｄｔｕｍｏｒＧｄ－ｌｏａｄｉｎｇｓｉｌｉｃａｐａｒｔｉｃｌｅｓｔｉｓｓｕｅｓ．ｗｅｒｅｏｂｓｅｒｖｅｄｔｏｂｅｍａｉｎｌｙｉｎｌｉｖｅｒ，ｓｐｌｅｅｎ，ｌｕｎｇＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＡｎｅｗｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｈａｄａｎｄａｇｏｏｄｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ，ａｎｄｍｉｇｈｔｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆｂｅｃｏｍｅａｎｏｖｅｌｔａｒｇｅｔｅｄａｎａｌｙｓｉｓＭ砒ｃｏｎｔｒａｓｔｏｆｔｈｅａｇｅｎｔｆｏｒｔｈｅａｎｄｉｍａｇｉｎｇｄｉｓｅａｓｅ．Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃｌｕｎｇｔｉｓｓｕｅｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒｔｉｓｓｕｅｏｆｔｈｅｍｉｃｅｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｄｅａｔｈｍａｙｂｅｄｕｅｔｏｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＭａｇｎｅｔｉｃＮａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ；ｒｅｓｏｎａｎｃｅｉｍａｇｉｎｇ；Ｃｏｎｔｒａｓｔａｇｅｎｔ；Ｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ；Ａｃｕｔｅｔｏｘｉｃｉｔｙ原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：掭日鼽ＩＤ年ｒ月岁ｂ日学位论文使用授权声明本人完全了解中山大学有关保留、使用学位论文的规定，即：。学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版，有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆、院系资料室被查阅，有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其他方法保存学位论文。中山大学硕士学位论文第一章前言自从１９７３年Ｌａｕｔｅｒｂｕｒｃｌｌ在纽约州立大学研制成功第一台磁共振成像仪，首次实现磁共振成像（ｍａｇｎｅｔｉｃｒｅｓｏｎａｎｃｅｉｍａｇｉｎｇ，ＭＲＩ）以来，这一技术在生物学、医学和材料学等领域得到了迅速发展和广泛应用。医学磁共振成像利用人体中的氢质子（Ｐｒｏｔｏｎ）在强磁场内受到射频脉冲的激发，产生核磁共振现象，经过空间编码技术，将以电磁形式放出的核磁共振信号接收转换，通过计算机最后形成图像【２１。与ＣＴ、超声、核医学等医学影像检查技术相比，ＭＲＪ具有许多突出优点，如：①无电离辐射和放射性；②可实现多序列、多参数成像；③不需改变体位便可施行任意方位层面的扫描；④较高的空间和组织分辨率和对比度，且无骨质伪影：⑤能反映被检测组织水质子周围环境并获取有关生理生化信息，可提高对心脏、大血管形态和功能的诊断。所以这一成像技术已成为当今临床诊断中最为有力的检测手段之一，广泛应用于临床【３１。尽管Ｍ刚具有众多优点，但在实际工作中发现某些病变与正常组织的Ｔｌ甚至Ｔ２弛豫时间无明显差别，有些病变虽有明显的异常信号，但诊断与鉴别诊断仍较困难，还有些病变较小不易显示。因此，在临床Ｍ刚检查中，我们常常需要用磁共振造影剂（ｃｏｎｔｒａｓｔａｇｅｎｔ）改变体内局部组织中水质子弛豫率以提高正常结构与病变组织的成像对比度，发现病变的特性和反映病变的组织学特征、血供水平及其生物学特性，或显示体内器官的功能状斛３１。氢核的Ｍ鼬信号是多种组织的Ｍ刚信号源，Ｍ刚的组织信号强度主要取决于组织的质子密度、弛豫时间（Ｔ１或Ｔ２）、磁场强度以及扫描序列。软组织中氢质子密度变化很小，因此在诊断中使用Ｔ１加权成像、Ｔ２ＪＪｎ权成像。ＭⅪ造影剂本身并不产生信号，它的作用在于改变组织内部氢核系统的弛豫时间，通过影响质子的弛豫时间Ｔｌ或Ｔ２达到增强或降低其信号强度的目的，使其产生可以令ＭＲＩ检测到的信号１４１。造影剂的功能依赖于它在组织中的浓度及组织中质子密度及运动情况。目前国内医学界一般把ＭＲＩ造影剂分为以下３类：顺磁性、铁磁性、超顺磁性。又因磁共振造影剂改变组织ＭＲ特征性参数，主要是缩短Ｔ１和（或）Ｔ２弛豫中山大学硕士学位论文时间，可分为Ｔ１弛豫造影剂和Ｔ２弛豫造影剂。临床应用最广泛的是顺磁性磁共振造影剂二乙三胺五乙酸钆（Ｇｄ．ＤＴＰＡ），是一种Ｔ１弛豫造影剂，它可以增强组织之间的信号差异，显示微小病灶以及与正常结构相仿的病灶，有效地提高了磁共振成像的诊断水平１５１。随着磁共振血管成像（ＭａｇｎｅｔｉｃＲｅｓｏｎａｎｃｅＡｎｇｉｏｇｒａｐｈｙ，ＭＲＡ）的应用与发展，Ｇｄ－ＤＴＰＡ已成为增强ＭＩ洫管成像的主要造影剂。然而，随着临床应用的增加，发现Ｇｄ．ＤＴＰＡ有一些不足，如：体内消除太快（入血后可迅速通过细胞间隙，并经肾脏排泄）；体内分布没有特异性【６，７１，使ＭＲ图象对比不能明显改善；而且Ｇｄ．ＤＴＰＡ是一种结构非常稳定的化合物，难以与生物大分子螯合，不能作为靶向显像的载体【８一ｉ。另一方面，典型的Ｔ２弛豫造影剂——纳米超顺磁性氧化铁（ｓｕｐｅｒｐａｒａｍａｇｎｅｔｉｅｉｒｏｎｏｘｉｄｅ，ｓＰＩＯ）００１，是由网状内皮系统清除的造影剂，颗粒直径约３０＂－－５００ｎｍ，从血液中清除主要由肝脾的网状内皮系统进行，因此可以作为以网状内皮系统为靶器官的造影剂应用于肝，脾和淋巴结成像１１１－１３】。氧化铁纳米颗粒具有超顺磁性特征，磁敏感性高，而其纳米尺寸使其具有与众不同的生物分布，从而具有与常规磁共振造影剂不同的新的成像能力【ｌ４１。到目前为止，氧化铁纳米颗粒一直是唯一临床使用的纳米磁共振成像造影剂，许多研究都集中在开发更高效率的Ｔ２纳米颗粒磁共振造影剂ｆ１２，”·”】。ＳＰＩＯ磁化速度比顺磁性物质快，在外加磁场不存在时，其磁性消失，在外加磁场存在时，表现出强烈的磁化作用，造成微磁场的不均匀，而质子通过这种不均匀的微磁场时，改变了其横向磁化相位，加速了去相位过程，明显地缩短ＴＴ２（Ｔ２＊），且ＩＩＴ２（Ｔ２＊）弛豫增强，因此，ＳＰＩＯ增强的Ｔ２ＷＩ及Ｔ２掌Ｍ上，有ＳＰＩＯ分布的组织其信号强度明显降低。而ＳＰＩＯ的高磁化率使其能以极低的检测限在细胞的标记及定向方面高度灵敏的示踪【Ｍ１。然而，这些基于超顺磁性纳米粒子的Ｔ２造影剂也存在一些缺点，限制其临床的广泛应用。本质上，它们是属于使ＭＲ图像信号降低的负性造影剂，由此产生的低信号，使得图像对比度比Ｔ１造影剂的要低，并且会与其他原因（如出血，钙化，金属沉积等）所致的低信号混淆，从而误导临床诊断。此外，高磁敏感性的超顺磁性造影剂对邻近正常组织的磁场也会产生干扰，导致图像模糊或病灶周围背景的破坏，这种局部失真称为磁敏感伪影或模糊效应，往往成为准确诊断病变状态的主要障碍【１４Ｉ。特别是，由于磁性颗粒的聚集等所致额外的Ｔ２＊缩短，因为粒子标记组织与Ｔ２＊力Ｎ权图像２中山大学硕士学位论文的信号损失之间的关系并非线性关系，超顺磁造影剂所致的信号变化难以量化。因此，迫切需要研制一种磁敏感性高，易于表而修饰连接特异性配体，且生物相容性良好的新型纳米造影齐ｆＪ，应用于磁共振分子影像研究【＂，１８】。随着纳米技术的迅速发展及其与生物医学结合的同益深入，磁性纳米粒子在生物标记与分离【１９Ｊ、核磁共振成像ｍ１、组织修复【２ｉ１、药物载体［２２ｌ以及疾病诊断与治疗【２３１等方面显示出广阔的应用前景。介孔材料的问世为材料科学领域注入了新鲜的血液，一经诞生，即得到物理学、化学与材料学界的高度重视，并得到迅速发展。它具有优良的物理、化学性能，在化学、光电子学、电磁学、材料学、环境等诸多领域有巨大的潜在应用前景，因而成为交叉学科的研究热点之一。根据国际纯粹与应用化学协会０ＵＰＡＣ）的定义【２４１，孔道尺寸小于２ｎｍ的多孔材料为微孔材料，大于５０ｎｍ的多孔材料为大孔材料，介于２ｎｍ．５０ｒｉｍ的多孔材料为介孔材料。微孔材料在有机反应中，可作为酸催化剂、碱催化剂和氧化还原催化剂，但由于这类微孔材料孔径尺寸小于２ｎｍ，直径大的分子不能进入其孔腔发生反应或在孔腔内产生的大分子不能快速逸出，从而大大地限制了其对有机大分子的催化与吸附作用等的应用范围。对于大孔材料，尽管孔径尺大于５０ｒｉｍ，但同时存在着孔道形状不规则、尺寸分布过宽等缺点。而介孔材料与原有的微孔沸石介孔材料和大孔材料相比，不仅孔径适中，长程结构有序，具有较大的比表面积和壁厚，并且具有较高的热稳定性和水热稳定性。介孔材料的结构和性能介于无定形无机多孔材料（如无定形硅铝酸盐）和具有晶体结构的无机多孔材料（如沸石分子筛）之间，其主要特征为：（１）具有规则的孔道结构；（２）；ｆＬ径分布窄，且在１．５．２０ｎｍ之间可以调节；（３）经过优化合成条件或后处理，可具有很好的热稳定性和一定的水热稳定性；（４）颗粒具有规则外形，且可在微米尺度内保持高度的孔道有序性。１９９２年，美国Ｍｏｂｉｌ公司的ＫｒｅｓｇｅＣＴ等【２５１、．ＢｅｃｋＪＳ等【２６１首次报道以烷基季按盐阳离子表面活性剂的聚集体为模板合成了孔道直径范围为１．５．２０ｎｍ介孔材料，是沸石分子筛合成史上的重大突破。他们成功开发出一类有序介孔材料Ｍ４１Ｓ（ＭＣＭ．４１、ＭＣＭ．４８、ＭＣＭ．５０）。Ｍ４１Ｓ材料具有规整的中孔结构。孔径根据合成条件的不同可以在１．５．２０ｈｍ２＿问调节，按有序孔道的形状可分为六方有序孔道中山太学硕士学位论文排列的ＭＣＭ－４１、立方有序孔道排列的ＭＣＭ－４８和层状排列的ＭＣＭ一５０。其结构如下图Ｉ．１㈣。移鳓渝ＭＯ－１－４１（∞卉方．空闻群ｐ自肿）ｂＭＯｄ－４８泣方．空间群Ｉｄｄ）ｃＮＯｄ－５０侣状．空问群ｐ２Ｊ图ｌ一１Ｍ４１Ｓ系列中孔结构图：ａ）ＭＣＭ一４１；ｂ）ＭＣＭ．４８：ｃ）ＭＣＭ一５０从图１—１看出，ＭＣＭ．４１具有六方对称性排列的直孔道，ＭＣＭ－４８具有三维螺旋交叉ｆＬ道，ＭＣＭ一５０具有层状结构。ＭＣＭ．４８的台成条件比较苛刻，文献报道相对较少。ＭＣＭ－５０由于具有不稳定的层状结构而应用前景较小。ＭＣＭ＿４Ｉ是Ｍ４１Ｓ家族中最具有代表性的一员，它具有狭窄的孔径分布，短程无序而长程有序．比表面积大于７００ｍ２／ｇ，吸附量高于０７ｃｍ３／ｇ，并且具有较高的热稳定性和怠好的水热稳定性，从产物的结构来看，它具有中介相的长程有序、纳米晶胞、维数可调等特点，在很多方面都符合当今热门的功能材料的要求，这些性质引起了广大学者的普遍重视和强烈兴趣，是研究最为广泛，非常有应用前景的介孔材料。含杂原子的ＭＣＭ．４１舟孔材料的研究始于１９９５年，ＣｏｒｍａＡ等㈣阻ＭＣＭ－４１介孔材料负载Ｎｉｏ和Ｍ００３，并将其应用于催化领域。ＢｌａｓｅｏＴ等畔埘Ｔｉ－ＭＣＭ＿４Ｉ的合成、表征及其催化活性进行了研究。２００４年，ＡｄｈｙａＰａｋＰｖ等９“以模板法在ＭＣＭ＿４Ｉ介孔材料孔道内制各了银纳米线，井对其光学性能进行了研究。２００５年，ＢｏｒｅＭＴ等㈨在孔径２２ｎｍ－６５ｒａｎ的介孔材料孔道内制各了高度分散的金粒子。生物氧化硅纳米材料无毒性，易与各种生物大分子结合；而且约１００ｒａｎ太小的颗粒，易于渗透过肿瘤性不完整的毛细血管网进入肿瘤组织间隙，而难以通过正常组织的血管内皮细胞间隙，从而在肿瘤组织中有特定浓聚阢”１。ＴａｙｌｏｒＫｉｄ等…Ｉ将Ｇｄ组装至介孔硅纳米中．利用该材料多孔性结构特征，使位于纳米孔道中山大学硕士学位论文表面的钆离子与通道内流动的水质子紧密接触，快速交换，从而显著增强了组织弛豫率。同时Ｃａｒｎｉａｔｏ［３５１、Ｋｉｍｔ３６１、Ｈｓｉａｏｔ”１、ＢａｅＫＨ【３８ｌ矛ｌｌＲｉｅｔｅｒｌ３９１等也制备出有望成为磁共振造影剂的含钆纳米材料。有序介孔硅因其能荷载大量易于与水分子接触的Ｇｄ，被认为是磁共振增强杂化材料的理想载药平台。目前，合成介孔材米ｓｔＭＣＭ．４１的方法有水热合成法、室温合成法、微波合成法、湿胶焙烧法、相转变法以及在非水体系中合成等等。其中，最常用的方法是水热合成法，这种方法合成的样品在孑Ｌ道结构、热性能等方面的性能最为优异，自从ＫｒｅｓｇｅＣＴ等，ＢｅｃｋＪＳ等【２６１首次合成出新型介孔材料Ｍ４１Ｓ材料以来，这种方法一直被广泛采用。综上所述，在临床Ｍ砌检查中，我们常常需要使用磁共振造影剂提高正常结构与病变组织的成像对比度，而临床常用的造影齐ｔＪＧｄ．ＤＴＰＡ及ＳＰＩＯ各有明显的不足，因此，迫切需要研制一种磁敏感性高，易于表面修饰连接特异性配体，且生物相容性良好的新型造影剂，应用于磁共振分子影像研究【１７，１８１。本研究在前期工作的基础上【４０１，采用新型的高分子模板，改进制备工艺，制备一种中等粒径的含钆纳米材料——介孔二氧化硅钆掺合纳米颗粒（ｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇＭＣＭ一４１ｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ，Ｇｄ－ＭＣＭ－４１），检测其表征，并初步分析该纳米材料在活体内与移植瘤的磁共振成像情况，观察其在昆明小鼠的急性毒性及体内分布情况，为进一步评估其应用于活体磁共振分子成像的可行性提供依据。中山大学硕士学位论文第二章材料和方法２．１实验材料２．１．１实验动物ＳＰＦ级Ｂａｌｂ／ｃ裸鼠１４只，雌性，４．６周龄。购自广州中医药大学实验动物中心。昆明种小白鼠（清洁级）７３只，雌性３８只，雄性３５只，由中山大学实验动物中一Ｉｉ，提供，４－６周龄，体重为１８＂－－－２２ｇ。本研究对动物的处理符合中山大学动物实验伦理学规范。２．１．２主要试剂阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化胺（ｃｅｔｙｌｔｒｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍｂｒｏｍｉｄｅ，Ｃ１６ＴＡＢ）、正硅酸乙酯（ｔｅｔｒａｅｔｈｏｘｙｓｉｌａｎｅ，ＴＥＯＳ）和ＧｄＣｌｙ６Ｈ２０（美国ＳｉｇｍａＣｈｅｍｉｃａｌ公司），六水合氯化钆（ＧｄＣｌ３·６Ｈ２０）（Ａｌｆａ公司），兔抗鼠抗体ＣＤ６８（英国ＡｂＤＳｅｒｏｔｅｃ公司）。２．１．３主要仪器Ｉ电感耦合等离子体发射光谱仪（ＩＣＰ—ＡＥＳｌ（ＳＰＥＣＴＲＯＣＩＲＯＳＶＩＳＩＯＮ，德国斯派克分析仪器公司）、高分辨透射电子显微镜（ＨＲＴＥＭ）（ＪＥＭ．２０１０ＨＲ，日本电子株式会社）、Ｘ射线能谱仪（ＥＤＳ）（ＩＳＩＳ．３００，英国Ｏｘｆｏｒｄ公司）、Ｘ射线衍射仪（ｐｏｃｓＤ８ＡＤＶＡＮＣＥ，德国布鲁克ＡＸＳＸ射线分析仪器公司）、０．５Ｔ核磁共振分析仪（ＮＭｌ２０．Ａｎａｌｙｓｔ，上海纽迈电子科技有限公司）、１．５Ｔ超导型磁共振成像系统（ＧＥ，Ｓｉｇｎａ，ＨＤｘ１．５Ｔ，美国ＧＥ公司）。２．２实验方法１２．２．１含钆纳米材料Ｇｄ．ＭＣＭ．４１的制备与表征参照我们以前纳米制备技术与文献资料ｆ４叫钔，将４ｍＬ２５０ｇｅＬ的浓氨水溶于８０ｍＬ去离子水中，然后加入０．５ｍｍｏｌ十六烷基三甲基溴化铵（Ｃ】６ＴＡＢ，分析纯）和ｌｍＬ１００ｇ／Ｌ的聚乙二醇（ＰＥＧ），于室温下搅拌溶解，再加入ｌＯｍｍｏｌ正硅酸乙酯（ＴＥＯＳ），室温下搅拌２ｈ后得到反应产物，将产物干燥后得到介孔二氧化硅ＭＣＭ－４１原粉，在５００＂Ｃ焙烧５ｈ后脱出模板剂，即可得纳米级ＭＣＭ．４１粉１本文材料制备及表征、弛豫率ｒｌ、ｒ２的测定实验由合作者中山大学化学系李幸、物理系刘桓共同完成，方法及结果双方共享。６体。然后将ＭＣＭ．４１粉体溶于一定量的去离子水中，混合均匀后加入０．５ｍｍｏｌＧｄＣｌ３．６Ｈ２０搅拌２ｈ后，用１ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＯＨ溶液（或者１ｍ０１／Ｌ的氨水溶液）调节ＰＨ值为８－９，继续搅拌反应２ｈ后，离心，洗涤，干燥即可得Ｇｄ—ＭＣＭ．４１。将含钆纳米颗粒溶『ｆＪ７｝于磷钨酸溶液中，超声波振荡后，滴到覆盖了无定形碳膜的铜网上，烘干后，放入高分辨透射电子显微镜进行观察，加速电压为２００ｋＶ，观察钆纳米颗粒的形状、大小、表面特性。Ｘ射线能谱仪测量纳米材料内的钆含量，脉冲处理时间５，束斑直径５，加速电压１８ｋＶ，活时间７５ｓ。Ｘ射线衍射仪（Ｃｕ靶妣射线，辐射波长护Ｏ．１５４０５６ｎｍ）作用电压３５ｋｖ，工作电流３５ｍＡ，扫描角度１．２０～８．Ｏｏ和５０－一６００，测试颗粒的介孔结构和物相结构。２．２．２弛豫率ｒＩ、ｒ２的测定０．５０．２５Ｔ核磁共振分析仪测定样品的ｒ１、ｒ２。分别将不同浓度（０．０１、０．０５、０．１、ｍｍｏｌ／Ｌ）的Ｇｄ．ＭＣＭ．４１，加入分散剂Ｔｗｅｅｎ研磨分散的Ｇｄ．ＭＣＭ一４１，Ｇｄ．ＤＴＰＡ水溶液以及去离子水装入核磁管，密封，然后置入磁共振分析仪的磁体内，进行扫描分析并测量Ｔ１、Ｔ２。根据公式（１／Ｔｉ）。ｂ。ａ＝（１／Ｔｉ）ａ＋Ｒｉ［Ｃ］（ｉ－－１，２）‘４５１，Ｏ／Ｔ０。ｂｓｄ为不同浓度时样品的质子弛豫速率，（１／Ｔｉ）ｄ为无顺磁性物质存在时水的质子弛豫速率，［Ｃ】为对应于弛豫率的样品浓度，计算出Ｇｄ．ＭＣＭ．４１、Ｔｗｅｅｎ研磨分散的Ｇｄ．ＭＣＭ．４１、Ｇｄ．ＤＴＰＡ在Ｏ．５Ｔ的质子弛豫率ｒｌ、Ｉ＂２（ｍＭＪｓ以）。２．２．３体外ＭⅪ扫描按照Ｇｄ．ＭＣＭ．４１中ｎ（Ｓｉ）：ｎ（Ｇｄ）＝２０：１，其中Ｓｉ的存在形式为Ｓｉ０２，Ｇｄ的存在形式为Ｇｄ２０３，以每ｔｏｏｌ的Ｇｄ为单位，该Ｇｄ．ＭＣＭ．４１的分子量为１３８１．２５９／ｔｏｏｌ。将含钆纳米颗粒悬浮于４ｇ／Ｌ的羧甲基纤维素溶液，配制浓度分别为１、Ｏ．５、Ｏ．２５、０．１、０．０５、Ｏ．０２５ｍｍｏｌ／Ｌ的悬浮液，置于１．５ｍＬＥＰ管内，进行ＭＲＩ扫描，并与相同浓度常规Ｍ对造影剂Ｇｄ。ＤＴＰＡ进行对比观察。采用３英寸表面线圈，自旋回波（ＳｐｉｎＥｃｈｏ）序列，ＴＲ＝５００ｍｓ，ＴＥ＝１５ｒｎｓ，Ｍａｔｒｉｘ＝２５６×２０４，ＦＯＶ＝１３ｃｍｘｌ３ｃｍ，层厚＝２．０ｔｏｎｉ，无间隔，ＮＥＸ＝２。２．２．４体内Ｍ砒扫描实验选取Ｂａｌｂ／ｃ裸鼠６只，４．６周龄，雌性，饲养于ＳＰＦ环境，随机分成２组，分别为实验组（注射钆纳米造影剂Ｇｄ．ＭＣＭ．４１），对照组（注射常规造影剂Ｇｄ．ＤＴＰＡ）。将Ｏｄ—ＭＣＭ－４１悬浮于４ｇ／Ｌ的羧甲基纤维素溶液，配成混悬液，质量浓度为２．２０９６ｍｇ／ｍＬ，高温高压消毒。使用前经超声振荡仪６００Ｗ振荡５ｒａｉｎ，中山大学硕士学位论文使其完全分散均匀。采用２％戊巴比妥纳２ｍＬ／ｋｇ对裸鼠行腹腔注射麻醉，按０．１ｍｌ／１０９的给药量，从鼠尾静脉注射给药，剂量为２２．０９６ｍｇ＆ｇ（相当于Ｏ．０１６ｍｍｏｌＧｄ／ｋｇ），对照组注射相同剂量的常规造影剂Ｇｄ．ＤＴＰＡ。采用磁共振（ＧＥ，Ｓｉｇｎａ，ＨＤｘ１．５Ｔ，美国ＧＥ公司）扫描，３英寸表面线圈，轴位Ｔ１Ｍ，ＳＥ序列，ＴＲ＝４００ｍｓ，ＴＥ＝１３ｍｓ，Ｍａｔｒｉｘ＝２５６ｘ１６０，ＦＯＶ＝８ｃｍｘ８ｃｍ，层厚＿２．０ｎ＇Ｌｒｎ，无间隔，ＮＥＸ＝２。先行平扫，然后分别于注射后１ｍｉｎ、５ｍｉｎ、１５ｍｉｎ、３０ｍｉｎ、６０ｍｉｎ、９０ｍｉｎ、１２０ｍｉｎ、１５０ｍｉｎ行裸鼠磁共振扫描，对比观察实验组及对照组的成像和肝肾动态分布情况。２．２．５移植瘤ＭＲ增强扫描成像选取Ｂａｌｂ／ｃ裸鼠６只，雌性，４．６周龄，裸鼠腋背部接种鼻咽癌ＣＮＥ．２细胞株４周后，肿瘤直径约１．２－１．５ｃｍ，建立鼻咽癌ＣＮＥ．２裸鼠移植瘤模型。随机分成２组，实验组从鼠尾静脉注射２２．０９６ｍｇ＆ｇ（０．０１６ｍｍｏｌＧｄ／ｋｇ）的Ｇｄ．ＭＣＭ－４１悬浮液（样品准备同２．２．４），对照组注射相同剂量的常规造影剂Ｇｄ．ＤＴＰＡ。扫描参数同２．２．４，行鼻咽癌ＣＮＥ．２裸鼠移植瘤ＭＲ扫描，观察ＣＮＥ．２移植瘤的强化情况，测量肿瘤组织增强值。２．２．６Ｇｄ．ＭＣＭ．４１的稳定性检测将Ｇｄ．ＭＣＭ．４１溶解于磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）中，配制浓度为０．１ｍｍｏｌ／Ｌ的悬浮液，模拟人体温度置于３７℃水浴环境中，４８ｈ后离心（１００００５ｒ／ｍｉｎ，ｒ＝８．５ｃｍ）ｒａｉｎ后收集上清液，电感耦合等离子体发射光谱仪（ＩＣＰ．ＡＥＳ）测试游离钆离子含量。昆明种小白鼠３只，雌性，含钆纳米颗粒悬浮液（５８．７１ｍｇ／ｋｇ）尾静脉给药后分别于１、４、２４ｈ取血，离心去除细胞及大分子物质，取上清ＩＣＰ．ＡＥＳ测试游离钆离子含量，观察钆是否从纳米材料中析解出来。２．２．７急性毒性实验取昆明种小白鼠（清洁级）７０只，雌雄各半，体重为１８＂－－２２ｇ，随机分为７个组，每组ｌＯ只，雌雄各半。每５只同组同性别小鼠群饲，环境温度为２１：ｔ：２０Ｃ，相对湿度为５５士１０％，观察各组小鼠生理状态，给药前及处死前称各鼠体重，并计算体重增加值。根据预实验所获得的０致死量和１００％致死量的给药剂量范围，分为６个剂量组，相邻剂量组的剂量之间比例为１：０．９，每个剂量组给药的剂量分别为９９．４３、８９．４９、８０．５４、７２．４９、６５．２４、５８．７１ｍｇ／ｌ（ｇ，阴性对照组小鼠尾静脉注射０．９％生理盐水０．２ｍＬ。将Ｇｄ．ＭＣＭ．４１悬浮于４ｇ／Ｌ的羧甲基纤维素溶液，配成中山大学硕士学位论文混悬液，质量浓度分别为９．９４３、８．９４９、８．０５４、７．２４９、６．５２４、５．８７１ｍｇ／ｍＬ，高温高压消毒。使用ｌ狮经超声振荡仪６００Ｗ振荡５ｍｉｎ，使其完全分散均匀。根据体重计算各小鼠尾静脉注射Ｇｄ．ＭＣＭ．４１悬浮液的量，按０．１ｍｌ／１０９的给药量，单次尾静脉注射给药，注射速度约为０．５ｍＬ／ｍｉｎ。各组小鼠连续观察１４ｄ，计算各组小鼠死亡总数，将小鼠死亡数输入计算机，采用ＢＳＡＳ软件根据Ｂｌｉｓｓ法计算出Ｇｄ．ＭＣＭ。４１悬浮液的半数致死量（ＬＤｓｏ）及其９５％可信限。２．２．８小鼠主要脏器的病理学观察将给药后死亡的小鼠及时解剖和存活小鼠连续观察１４ｄ后解剖，取主要脏器（心、肺、肝、脾、肾、脑），大体标本观察脏器颜色、形态，然后用１０％福尔马林液固定过夜，经脱水、透明、浸蜡、包埋制成石蜡块，经切片后行苏木精．伊红染色（ＨＥ染色），进行病理组织学观察。给药后第１４天对给药组（８９．４９ｍｇ／ｋｇ）及对照组（注射０．９％生理盐水）小鼠肝脏库否细胞采用免疫组织化学ＳＰ法进行染色观察，肝脏标本取下后立即用１０％福尔马林液固定４．８ｈ，脱水，石腊包埋后切片，应用常规免疫组织化学（ＳＰ法）检测ＣＤ６８的表达，比较给药组及对照组小鼠肝脏库否细胞数量与形态有无差异。２．２．９纳米颗粒荷瘤小鼠体内分布选取Ｂａｌｂ／ｃ裸鼠２只，雌性，４－６周龄，裸鼠腋背部接种鼻咽癌ＣＮＥ．２细胞株４周后，肿瘤直径约１．２～１．５ｃｍ，建立鼻咽癌ＣＮＥ．２裸鼠移植瘤模型。从鼠尾静脉注射２．２０９６ｍｇ／ｍＬ的Ｇｄ．ＭＣＭ．４１悬浮液０．２ｍＬ，分别于给药后１、４ｈ解剖，取主要脏器（心、肺、肝、脾、肾、脑、肿瘤组织），采用戊二醛一锇酸双重固定法固定，经脱水、组织块染色、浸透和包埋、超薄切片、切片染色，进行透射电镜观察。２．２．１０统计学处理采用ＳＰＳＳｌ３．０统计软件进行分析，组间比较采用ｆ检验，双侧尸Ｉ＜０．０５表示差异有统计学意义。９中山大学硕士学位论文第三章结果３．１含钆纳米材料Ｇｄ．ＭＣＭ．４１的制备及表征采用新的纳米制备技术，以阳离子表面活性剂（Ｃ１６ＴＡＢ）为模板，以正硅酸乙酯（ＴＥＯＳ）为氧化硅纳米材料来源，采用ＧｄＣｈ·６Ｈ２０为原料通过在碱性溶液中生成Ｇｄ（ＯＨ）３的方法将Ｇｄ组装到ＭＣＭ．４１中，成功制备含钆纳米材料——介孔二氧化硅钆掺合纳米颗粒（Ｇｄ．ＭＣＭ．４１）。制备的纳米材料呈圆球形（ｘ１０６倍），单个分散，大小均一，纳米颗粒粒径约８０ｎｍ－１５０ｎＩｎ，平均粒径１２０ｎｍ（图３．１）。加入分散剂Ｔｗｅｅｎ分散后，其分散性良好，颗粒直径无明显变化（图３．２）。Ｘ射线能谱仪（ＥＤＳ）分析结果显示一定强度的金属钆峰位，说明金属钆已经成功掺杂至多孔纳米材料内（图３．３），能谱强度测定得到该复合材料内钆含量约１１１．９９／ｋｇ，各元素的原子百分比约为Ｏ：Ｓｉ：Ｇｄ＝４：２：０．１。（表３．１）。表３．１Ｇｄ．ＭＣＭ．４１中各元素含量Ｘ射线衍射仪测得纯ＭＣＭ．４１的ＸＲＤ小角衍射谱图（图３．４）及Ｇｄ．ＭＣＭ．４１的ＸＲＤ小角衍射谱图（图３．５、图３．６），从图３－４可看出，在小角区出现三个ｈｋｌ衍射峰：在２．５０左右有一强衍射峰，归属于（１００）晶面；在４－６０之间分别有两个小峰，各自归属于（１１０）、（２００）晶面，这些峰的位置与六方晶格ｈｋｌ衍射峰的位置相吻合１４６１，ＭＣＭ．４１为六方有序介孔结构。在２．３０之间的最强衍射峰为２．６１８０，利用布拉格公式ｄｌｏｏ＝Ｌ／２ｓｉｎ０可算出ｄ１００为３．３７ｎｍ。从图３．５可看出，在小角区和无Ｇｄ的ＭＣＭ．４１一样均出现三个ｈｋｌ衍射峰：在２．５０左右有一强衍射峰，归属于（１００）晶面；在４－６０之间分别有两个小峰，各自归属于（１１０）、（２００）晶面。这ＩＯ中山大学硕士学位论文些峰的位置与六方晶格ｈｋｌ衍射峰的位置相吻合【４６１，ＭＣＭ．４１仍为六方有序介孔结构，Ｇｄ的组装未破坏其六方有序结构。在２．３０之间的最强衍射峰为２．４８０，利用布拉格公式ｄ１００－－－ｋ／２ｓｉｎ０可算出ｄ１００为３．５６ｎｍ。由（图３－６）分析可知，掺杂了Ｇｄ的ＭＣＭ．４１的峰强度和纯的ＭＣＭ．４１相比大大的减弱了，表明掺了Ｇｄ后，Ｇｄ２０３对ＭＣＭ．４１的六方有序结构产生一定影响。Ｘ射线衍射仪测得纯ＭＣＭ．４１的ＸＲＤ广角衍射谱图（图３．７）及Ｇｄ．ＭＣＭ．４１的ＸＲＤ广角衍射谱图（图３．８）进一步证实纯的ＭＣＭ．４１和掺杂了Ｇｄ２０３的Ｇｄ．ＭＣＭ．４１都是非晶的无定形二氧化硅结构。３．２Ｇｄ．ＭＣＭ。４１的弛豫率ｒ１、ｒ２对弛豫率ｒｌ、ｒ２的检测表明（表３．２），未加入Ｔｗｅｅｎ研磨分散的时候，Ｇｄ．ＭＣＭ．４１的ｒｌ，ｒ２值均小于Ｇｄ．ＤＴＰＡ，加入Ｔｗｅｅｎ研磨分散后的ｒｌ，ｒ２值后得到很大的改善，ｒｌ，ｒ２值均明显大于Ｇｄ．ＤＴＰＡ。其弛豫效率曲线见（图３．９）。表３－２Ｇｄ．ＭＣＭ．４１、Ｔｗｅｅｎ分散的Ｇｄ．ＭＣＭ．４１、Ｇｄ．ＤＴＰＡ的弛豫率ｒｌ、ｒ２（ｍＭ’１Ｓ’１）３．３体外Ｍ砒成像Ｇｄ．ＭＣＭ一４１纳米颗粒悬浮液与Ｇｄ．ＤＴＰＡ造影剂的Ｔ１显影效果见（图３．１０）及（表３—３），由图３一１０和表３－３可见，Ｇｄ—ＭＣＭ．４１和Ｇｄ．ＤＴＰＡ的Ｔ１是随着浓度的降低而信号减弱，即磁共振Ｔ１加权像正增强，Ｇｄ．ＭＣＭ．４１的Ｔ１信号强度略高于相应浓度的Ｇｄ．ＤＴＰＡ的Ｔ１信号强度。表３－３各浓度ＧｄｏＭＣＭ．４１和Ｇｄ．ＤＴＰＡ的Ｔｌ信号强度中山大学硕士学位论文３．４体内ＭＲＩ成像实验组尾静脉注射２２．０９６ｍｇ／ｋｇ（Ｏ．０１６ｍｍｏｌＧｄ／ｋｇ）的Ｇｄ．ＭＣＭ．４１悬浮液，ｌｍｉｎ后腹主动脉信号强度明显增高，约３０ｍｉｎ后信号强度渐降，１５０ｍｉｎ信号强度仍高于平扫（图３．１１），大部分纳米颗粒在血液中滞留时间超过１ｈ。正常裸鼠肝脏平扫信号强度为１０３０＋８５（图３．１２Ａ），注射Ｇｄ．ＭＣＭ．４１悬浮液５ｍｉｎ后，肝脏组织开始强化，３０ｍｉｎ后，肝脏组织在Ｔ１Ｍ上信号较明显升高，其信号强度为１６８９４－１９３（平扫）（图３．１２Ｂ）；肾脏信号强度为１４００ａ：１２０（平扫为１０１２４－１１５），肝脏组织在１５０ｍｉｎ仍有明显强化，而肾脏强化已不明显。提示该新型造影剂在体内可能主要在肝脏分布，由肝脏代谢。而对照组尾静脉注射０．０１６ｍｍｏｌＧｄ／ｋｇ的Ｇｄ．ＤＴＰＡ后小鼠动脉、肝肾均未见明显强化，肝脏平扫信号强度为１０２５＋９０（图３．１２Ｃ），给药５ｍｉｎ后肝脏的信号强度为１１５０＋１９３（图３．１２Ｄ），肾脏的信号强度为１１６０－ａ：１２０（平扫为１０１０＋１０５）。３．４移植瘤ＭＲ增强扫描成像实验组尾静脉注射２２．０９６ｍｇ／ｋｇ（０．０１６ｍｍｏｌＧｄ／ｋｇ）的Ｇｄ．ＭＣＭ．４１悬浮液，鼻咽癌ＣＮＥ．２裸鼠移植瘤平扫信号强度为８７０士６３（图３．１３Ａ），注射样品１５ｍｉｎ后，移植瘤较明显强化（图３．１３Ｂ），信号强度为１０６４４－７０，而对照组尾静脉注射０．０１６ｍｍｏｌＧｄ／ｋｇ的Ｇｄ－ＤＴＰＡ，鼻咽癌ＣＮＥ．２裸鼠移植瘤平扫信号强度为８７６＋６５（图３－１３Ｃ），注射样品后未见明显强化，５ｍｉｎ后，其信号强度为９１５士７５（图３．１３Ｄ）。实验组ＭⅪ显示裸鼠移植瘤部位出现较明显强化，说明该钆纳米材料可在肿瘤组织内局部聚集。对照组Ｍｍ移植瘤未见明显强化，移植瘤强化程度低于实验组。３．５含钆纳米材料的稳定性电感耦合等离子体发射光谱仪（ＩＣＰ．ＡＥＳ）测试结果显示，体外纳米材料处理液以及小鼠体内血液处理液中均未检出钆元素（即在检测限０．０５ｍｇ／Ｌ以下）（图３．１４）。由此推断，钆纳米造影剂Ｇｄ．ＭＣＭ．４１在模拟体温环境与体内均不会析出游离钆离子，说明含钆纳米造影剂Ｇｄ．ＭＣＭ．４１稳定性良好。３．６小鼠急性毒性给药前，各组小鼠生理状态良好，尾静脉给药后，９９．４３、８９．４９、８０．５４、７２．４９、６５．２４、５８．７１ｍｇ／ｋｇ齐Ｕ量组各有１０、９、８、６、２、ｏＲ小鼠死亡，所有死１２，Ｊ，鼠均中山大学硕士学位论文出现烦躁、抽搐、步态不稳，于Ｉｍｉｎ～３０ｍｉｎＮ死亡。８９．４９、８０．５４、７２．４９、６５．２４ｍｇ／ｋｇ剂量组存活小鼠出现不同程度的烦躁、呼吸急促、步态不稳、厌食等，均于当天恢复正常。５８．７１ｍｇ／ｋｇ齐ＩＪ量组及对照组小鼠未见异常表现。含钆纳米材料ＬＤｓｏ为７２．７ｍｇ／ｋｇ，９５％可信限为６８．９，－－－，７６．７ｍｇ／ｋｇ，各组动物死亡情况见表３—４。各剂量组间存活小鼠体重增加值差别无统计学意义。表３．４尾静脉注射Ｇｄ－ＭＣＭ－４１纳米颗粒小鼠急性毒性结果（ｎ＝１０）对小鼠的主要脏器组织进行了病理检查，发现所有死亡小鼠肺脏（图３．１５）、肝脏（图３．１６）３１１肾脏（图３．１７）出现不同程度水肿、淤血等病变；肺动脉、小动脉及毛细血管内可见血栓形成或栓子栓塞（图３．１８）：部分死亡小鼠心腔淤血并可见大血凝块，冠状动脉内可见血栓形成（图３．１９）；但其脾脏（图３．２０）及脑组织（图３－２１）未见形态学异常。存活小鼠肺动脉、冠状动脉内未见血栓，肺脏（图３．２２）、肝脏（图３－２３）、肾脏（图３—２４）、心脏（图３－２５）、脾脏（图３．２６）及脑组织（图３．２７）未见明显形态学改变。肝脏库否细胞染色结果显示，ＣＤ６８表达于肝脏巨噬细胞，主要包括库否细胞，给药组及对照组ＣＤ６８１ｊＮ性表达的细胞数目和形态未见明显变化（图３．２８、图３．２９）。３．７纳米颗粒体内分布对小鼠的主要脏器及肿瘤组织进行了电镜检查，发现给药后１、４ｈ纳米颗粒均主要分布在肝、脾、肺及肿瘤组织（图３．３０）。透射电镜实验不仅能观察到器官或组织内单个的含钆硅纳米粒子，而且能显示其存在状态和亚细胞定位。纳米颗粒主要分布在肝、脾、肺、肿瘤组织。首先，纳米颗粒在肝脏、脾脏主要见于巨噬细胞，很少存在于肝细胞，而且，纳米颗粒又主要存在于巨噬细胞的溶酶体。中山大学硕士学位论文更重要的是，我们观察到含钆硅纳米颗粒在各器官仍然有较好的分散性，未见明显的聚集现象。纳米颗粒在肺组织中主要分布在上皮细胞胞质内。在肿瘤组织，纳米颗粒在肿瘤实质及间质内均有分布。而在心脏标本、肾脏标本及脑组织标本均未观察到纳米颗粒的存在。１４中山大学硕士学位论文第四章讨论自１９８３年以来临床常用的ＭＲ造影剂一直选用Ｇｄ．ＤＴＰＡ等钆类螯合物【３１，但Ｇｄ．ＤＴＰＡ磁敏感性低，结构非常稳定，难以修饰，难以与生物大分子螯合，不能作为分子显像的载体【８，９１。随着纳米技术的迅速发展及其与生物医学结合的日益深入，纳米磁性生物材料的问世，ＭＲ造影剂的选用有了新的方向。本研究在前期工作的基础上【４０１，改进制备工艺，采用新的模板，调整合成物的比例，调整溶液的酸度和合成温度［４３，４４１，成功制备一种新型、顺磁性高的含钆纳米材料Ｇｄ．ＭＣＭ。４１，该纳米材料呈圆球形颗粒，直径约８０ｎｍ－１５０ｎｍ，平均粒径１２０ｎｌｎ。与以前制备的短棒状纳米颗粒【４０】相比，球形颗粒成形较好，分散性改善，在体内分布更好，更符合临床应用要求。４．１含钆纳米材料的分散性及弛豫性能我们研究表明：该含钆纳米材料的弛豫率ｒｌ、ｒ２与其分散情况密切相关（表３．２），未加入Ｔｗｅｅｎ研磨分散的时候，Ｇｄ．ＭＣＭ．４１的ｒｌ，ｒ２值均小于Ｇｄ．ＤＴＰＡ，加入Ｔｗｅｅｎ研磨分散后的ｒｌ，ｒ２值均显著大于Ｇｄ．ＤＴＰＡ，可能与下列因素有关：①加入Ｔｗｅｅｎ研磨，增大Ｇｄ．ＭＣＭ．４１的分散性，使原来软团聚的颗粒得以分散在溶液中；②Ｔｗｅｅｎ的表面有一些活性基团可能会与Ｇｄ螯合，增强Ｇｄ的结合位点；③Ｔｗｅｅｎ作为一种表面活性剂，在低浓度时可以降低水的表面张力，使水分子更容易进入到介孔中。可见磁性纳米颗粒在悬浮液中的分散性对其磁学性质有着重要的影响，分散性越高其弛豫率越高，颗粒团聚会降低其弛豫性能，降低成像增强效果，并且可能聚集于毛细血管，造成血管栓塞的潜在危险。目前我们所称的纳米粒大多为固态。固体表面原子所处的环境有别于内部原子，内部原子被其他原子所包围，而表面原子只有部分与内部原子产生键合，另一部分则以“悬键”形式存在，这意味着表面原子与内部原子相比处于高能量状态，这一额外能量就是表面能，所以表面原子的集合会呈现出与内部原子集合不同的性质。由于通常块体的表面原子的数目远小于内部原子数目，因此块体的表面效应常常难于显现；但是，当物体处于纳米尺度后，由于处于表面的原子数目在体系中所占的比例增大，表面效应十分突出【４７１。纳米颗粒的表面效应主要从如中山大学硕士学位论文下方面对物质性质产生影响：①表面能增加；②提供数目众多的表面反应活性中心【４８１。由于纳米颗粒具有极大的比表面积和较高的表面能，在制备和使用过程中极易发生粒子团聚，形成二次粒子，使粒径变大，从而大大影响纳米颗粒发挥优势，失去纳米颗粒所具备的功能【４９１，因此改善纳米颗粒在液相介质中的分散和稳定性一直是研究者追求的目标。颗粒分散是指粉体颗粒在液相中分散开并在液相中均匀分布的过程，主要包括颗粒的润湿、大颗粒或颗粒团聚体的解聚及分散颗粒的稳定化三个阶段１５０１。悬浮液中固体颗粒的分散应遵循两个基本原则：①润湿原则（极性相似原则）：润湿通常指颗粒与颗粒之间的界面被颗粒与溶剂、分散剂等界面所取代的过程。颗粒必须被液体介质润湿，才能很好地浸没在液体介质中。②表面力原则：颗粒间的总表面力必须是一个较大的正值，才能使颗粒间有足够的相互排斥作用，以防其相互直接接触并粘着【５０】。分散技术根据分散方法的不同，可分为物理分散和化学分散。物理分散方法主要有机械搅拌分散、超声分散和高能处理法分散等。化学分散法常用的分散剂主要有表面活性剂、小相对分子质量无机电解质或无机聚合物、聚合物类、偶联剂类等。尽管物理方法可较好实现纳米颗粒在液相介质中的分散，但一旦外界作用力停止，粒子间由于分子间力作用，又会趋向于相互聚集。而化学分散法是通过改变颗粒表面性质使颗粒与液相介质、颗粒与颗粒间的相互作用发生变化，增强颗粒间的排斥力，将产生持久抑制絮凝团聚的作用。因此，实际过程中，应将物理分散和化学分散相结合用物理手段解团聚，用化学方法保持分散稳定以达到较好分散效果。牛永效掣５ｌ】研究表明加入适量的聚丙烯酰胺能使纳米Ｓｉ０２颗粒在水溶液中保持良好的分散稳定性，九水合硅酸钠和聚丙烯酰胺结合起来使用可以发挥协同效应，从而显著改善纳米Ｓｉ０２颗粒在水溶液中的分散稳定性。我们在制备纳米材料的时候加入了表面活性剂聚乙二醇（ＰＥＧ），在准备样品的时候加入了表面活性剂Ｔｗｅｅｎ、羧甲基纤维素并且研磨，超声分散等，保持了纳米颗粒悬浮液的稳定性。磁共振造影剂本身并不产生信号，其作用在于改变组织内部氢核系统的弛豫率，通过影响质子的弛豫时间Ｔ１或Ｔ２达到增强或降低其信号强度的目的，使其产生可以令Ｍ砌检测到的信掣４１。而Ｔ１的缩短过程要求水分子的氢核要尽可能地接近磁性微粒的磁性部分，达到弛豫增强的目的。如用脂质体包裹的造影剂，提高了其被动靶向性和／或主动靶向性，前者指静脉注射后在体内某些组织或器１６中山大学硕士学位论文官内自然聚集（主要被富含网状内皮细胞的肝脾摄取）；后者是通过在脂质体表面装配特异性归巢装置，使其靶向到特异性组织，或是通过改变脂质双层的磷脂组成，使脂质体在某些物理条件下不稳定，从而在特定的靶器官释放出造影剂【５２１。但是脂质体包裹的Ｇｄ．ＤＴＰＡ，由于脂质体限制了外部水分子同Ｇｄ．ＤＴＰＡ的接近，其增强效果弱于相同浓度的Ｇｄ．ＤＴＰＡｔ５引。而阴性（如ＳＰＩＯ）ＭＲ造影荆，Ｔ２缩短过程是一种远程效应，通过Ｔ２造影剂增强局部磁环境的不均匀性发挥作用，因此将Ｔ２类造影剂包入脂质体，因为脂质体的聚集产生了更大的局部磁环境的变化，其Ｔ２弛豫增强【５４１。多孔硅材料结构非常稳定，钆离子掺入后，钆在氧化硅中呈氧化态，与氧原子以共价键结合，可大大减低钆的生物毒性；同时钆离子移动受到限制【５５１，旋转速度减慢，有利于增强其弛豫能力。在临床０．１５Ｔ～ｌ’５Ｔ的场强中，氢核Ｌａｒｍｏｒ频率通常在６～６０ＭＨｚ（或１０７～１０卜ｓ１）范围内，而小分子Ｇｄ类络合物的旋转速率较快，为１０１０Ｓｑ左右，（高于Ｌａｒｍｏｒ频率），导致弛豫性能的下降两】，而氧化态的Ｇｄ掺杂在ＭＣＭ－４１介孔孔道中，旋转速度下降，可能较接近于Ｌａｒｍｏｒ频率，同时４ｎｍ左右的介孔孔道允许水分子的自由进出，增加了Ｇｄ与质子接触和交换率，因此弛豫性能有所提高。Ｈｕａｎｇ等【５７１研制出中空Ｇｄ２０３纳米颗粒及介孔Ｇｄ。０。纳米颗粒，并测得中空Ｇｄ：０。纳米颗粒的ｒ１、ｒ２分别为１７．７ｍＭ。Ｓ～、２６．６ｎＮｌＳ～，介孔Ｇｄ。０。纳米颗粒的ｒｌ、ｒ２分别为１６．８ｍＭ－１Ｓ～、３１．４ｍ９１Ｓ～。Ｈｕａｎｇ等认为中空及介孔Ｇｄ：０。纳米颗粒高弛豫率是由于其与质子的密切接触和水分子的自由快速交换。４．２含钆纳米材料的毒性含钆纳米颗粒溶解于磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）中，４８ｈ后，ＩＣＰ．ＡＥＳ检测未检出游离钆元素，同时，昆明小鼠静脉注射后１、４、２４ｈ，体内血液中也未检出游离钆元素（即在检测限０．０５ｍｇ／Ｌ以下），说明该纳米孔道内钆不易析解出来。前面提到多孔硅材料结构非常稳定，钆离子掺入后，钆在氧化硅中是氧化态，与氧原子共价键结合，而无游离的Ｇｄ”，钆离子移动受到限制【５５１，可大大减低钆的生物毒性。Ｈｕａｎｇ掣５７１考察了Ｇｄｚ０３纳米颗粒的生物相容性。通过ＩＣＰ检测发现含５．５ｍ／ｖｌＧｄ３＋的１ｍｇ／ｍＬ中空及介孔Ｏｄ２０３纳米颗粒浸出液游离钆仅分别为１７．２９Ｍ和３２．４９Ｍ。进而在使用Ｍｎ法和水溶性四氮Ｎ（ＷＳｒ－Ｏ法检测不同剂量（０—２００中山大学硕士学位论文ｐｅｇｍＬ）纳米颗粒共培养的Ｖｅｒｏ细胞（猴肾）的存活率的影响时，发现中空及介孔Ｇｄ２０３纳米颗粒均具有较好的生物相容性。我们进一步对Ｇｄ．ＭＣＭ．４１的急性毒性进行观察，从较高剂量组小鼠的快速死亡和病理组织学检查推测肺栓塞和冠状动脉栓塞死是小鼠死亡的原因，具体机制还不十分清楚。栓子的形成可能是由于血液的流动破坏了Ｇｄ．ＭＣＭ．４１纳米颗粒悬浮液的稳定性，致使颗粒之间相互聚集，并引发血管内凝血堵塞血管有关。Ｂｒｉｄｏｔ几等【５引、Ｂａｒｂ６Ｃ等１５９１、ＢｏｒｃｈａｒｄｔＧ等１６０］均观察到未修饰的硅纳米颗粒在小鼠及大鼠肺组织中有明显的沉积，并认为是由于纳米颗粒相互聚集所致。ＭａｒｇｏｌｉｓＪ等【６１１发现胶体硅可以诱发血栓形成，ＧｏｖｅｒｎａＭ等ｆ６２１发现无定形硅可以激活补体。很多研究表明纳米颗粒进入体内后，能够迅速被肝脏、脾脏等网状内皮系统（Ｒｅｔｉｃｕｌｏｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｓｙｓｔｅｍ，ＲＥＳ）中的巨噬细胞所吞噬１６３１。透射电镜检查，发现纳米颗粒分布于肝、脾、肺及肿瘤组织，然而由于电镜检查取材较少，纳米颗粒在不同组织的动态分布及含量有待ＩＣＰ进一步检测。肝脏库否细胞染色结果显示，给药组与对照组ＣＤ６８阳性表达的细胞数和形态未见明显变化，ＣＤ６８表达于肝脏巨噬细胞，主要包括库否细胞，免疫组化结果表明该纳米颗粒及纳米中的Ｇｄ不会对该细胞产生直接的毒性。随着纳米材料的广泛应用，使得研究者、生产者和消费者将有更多的机会接触纳米材料１６４］。然而由于纳米粒子具有巨大的比表面使得物质的表面能极高，极不稳定，易与其他原子相结合，前面提到的纳米颗粒团聚就是一个例证。纳米材料的这种超高反应活性使其在进入生命体后，它们的化学特性和生物活性与化学成分相同的常规物质有很大不同【６５】。国内外初步的动物实验及细胞学实验结果表明，普通无毒或低毒的材料，一旦细分成纳米级的超细颗粒后，就会产生潜在毒性，且颗粒愈小，表面活性愈大，生物反应活性也愈大；纳米材料进入细胞和机体，通过血脑、血睾和肺血屏障的几率与常规物质相比大大增加【６６Ｉ。因此对纳米材料生物安全性的研究就显得尤为迫切。目前很多学者对纳米材料在体内及体外的吸收、分布和转运，纳米材料的毒理学效应及其机制和纳米材料毒性的消除或减轻等进行了深入的研究。Ｉ研究表明纳米颗粒进入体内后，对各生理系统（如呼吸系统、心血管系统、神经系统、免疫系统）和各组织脏器（如肺、肝、肾、脾、皮肤）等均能产生毒中山大学硕士学位论文性效应。ＣｈａｌｕｐａＤＣ等［６７’研究表明长期暴露于低水平的大气颗粒物可导致哮喘、肺功能下降、肺部炎症反应及其他呼吸系统疾病。Ｏｂｅｒｄ６ｒｓｔｅｒ等【６８】用粒径为２０ｎｔｏ矛Ｎ２５０ｎｍ的Ｔｉ０２颗粒做了大鼠慢性吸入实验，发现２０ｎｍ组的肺部炎症反应强于２５０ｎｍ组。超细颗粒可导致人体凝血功能和血液粘皮上升，构成了心血管疾病发病的危险因素ｆ６９】。Ｏｂｅｒｄ６ｒｓｔｅｒ等【７０】让大鼠在含有粒径为２０ｈｍ的聚四氟乙烯颗粒的空气中生活１５分钟，大多数实验大鼠在随后４ｈ内死亡：而另一组生活在含１２０ｎｍ聚四氟乙烯颗粒的空气中的大鼠，没有表现出任何不适症状。不过，Ｏｂｅｒｄ６ｒｓｔｅｒ等并不认为这种结果可以简单地用尺寸来解释，但是可以断定，颗粒尺寸越小，越难以被巨噬细胞清除。ＳｕｚｕｋｉＫ等【７¨、ＵｒａｔａＣ等【７２】的研究表明过小的颗粒很容易团聚。ＮｅｍｍａｒＡ等【７３１研究静脉注射或支气管滴注不同剂量（５、５０、１００、５００、５０００ｐ．ｇ／ｋｇ体重）未经修饰或经羧基化和氨基化修饰的聚乙烯颗粒（６０ｈｍ）对小鼠血栓形成的影响，发现静脉注射羧基化修饰的聚乙烯颗粒（１００、５００ｒｔｇ／ｋｇ）显著抑制小鼠血栓的形成，而氨基化修饰的聚乙烯颗粒（１００、５００“眺ｇ）显著增强小鼠血栓的形成。这表明纳米颗粒诱导心血管系统的疾病与纳米颗粒的表面化学活性密切相关。虽然颗粒物所导致的心血管系统疾病的确切机制还不清楚，但已有的研究表明肺部炎症、血液粘度升高、血浆纤维蛋白原或Ｃ．反应蛋白的升高、血小板激活或纳米颗粒转运至血液循环直接作用于心血管系统等，这些因素均可能是纳米颗粒导致心血管系统疾病的原因【６９１。ＫｈａｎｄｏｇａＡ等【７４１研究表明经动脉注射的超细碳颗粒，可在小鼠肝组织富集，产生促凝血效应，从而导致肝组织微血管血小板聚集，促进血栓形成。Ｔｉｎ－Ｔｉｎ．Ｗｉｌｌ．Ｓｈｗｅ等【７５】研究了鼻腔滴注的超细颗粒对小鼠脑的影响，发现鼻腔滴注的１４ｎｍ超细碳颗粒诱导了嗅球细胞因子（ＩＬ．１Ｄ和ＴＮＦ．ｃ【）和化学趋化因子ｍＲＮＡ表达，而９５ｎｍ的超细碳颗粒并没引起相似的效应。ＣｈｅｎＺ掣７６】在纳米金属Ｃｕ颗粒的急性口服毒性研究中，发现２３．５ｎｍ的Ｃｕ颗粒诱导了小鼠肝细胞脂肪变性，引起小鼠脾小体萎缩、淋巴细胞减少及脾小体间质纤维化，导致了严重肾小球炎症和近端肾小管上皮细胞损伤，并且均具有明显的剂量．效应关系。而１７ｒｔｍ的Ｃｕ颗粒未引起小鼠明显的组织病理损伤。纳米材料能通过多种方式通过细胞质膜，进入细胞内部，在活细胞中，质膜对物质的通透性有高度的选择性，物质通过质膜主要有３种途径：被动转运、主动转运、内吞与Ｊ，Ｉ－丰ＩＩＥ作用。一些小分子能够以被动和／或主动转运的方式进入细胞，而一些大分子和颗粒性物质则主要通过内吞作用进入细胞【７７１。相对于粗颗粒１９中山大学硕士学位论文而言，纳米颗粒更容易逃避吞噬细胞的吞噬作用，增强与上皮细胞、内皮细胞、神经细胞的接触【７引。纳米颗粒不但可以进入细胞胞质中，还可以进入细胞核。ＣｈｅｎＭ等【７９１用激光共聚焦扫描显微镜和干涉相差显微镜研究荧光标记的Ｓｉ０２颗粒在上皮细胞的分布，发现４０～７０ｎｍ的Ｓｉ０２颗粒能够进入细胞核的染色质中Ｐ而０．２～５“ｍ的Ｓｉ０２颗粒仅出现在细胞质中，不能进入细胞核。ＬｏｖｒｉｃＪ等ｌ∞１比较了绿色和红色ＣｄＴｅ量子点的亚细胞分布，发现绿色阳离子量子点（２．２ｎｍ）主要位于大鼠小胶质细胞的细胞核中，而红色阳离子量子点（５．２ｎｍ）分布于细胞胞质中，同时发现２．２ｎｍ的ＣｄＴｅｌＺＨ离子量子点经胎牛血清白蛋白修饰后，也不能进入小胶质细胞的细胞核内。这些研究表明纳米颗粒的尺寸愈小，愈容易转运进入细胞核，纳米颗粒的表面修饰也会影响其进入细胞核的能力。由于纳米颗粒能够进入细胞乃至细胞核，而其较高的生物反应活性可能会导致其与细胞或亚细胞器发生相互作用，产生毒性作用。很多学者就纳米材料对细胞的影响及对亚细胞器如线粒体和细胞核的损伤进行了研究。Ｏｂｅｒｄ６ｒｓｔｅｒ等【６８ｌ比较了大鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）对相同质量不同尺寸的Ｔｉ０２（２０ｎｍ和２５０ｈｍ）粉末的清除机制，发现ＡＭ清除２０ｎｔｏＴｉ０２的半衰期为５４１ｄ，清除２５０ｎｍＴｉ０２的半衰期为１７７ｄ。这表明，颗粒尺寸越小，越难以被巨噬细胞清除，巨噬细胞清除外来毒物的能力降低，其吞噬能力也会降低。ＬｏｎｇＴＣ等【８１ｌ研究Ｔｉ０２（５０—１２０ｐｐｍ，３０ｎｔｏ）纳米颗粒对小胶质细胞的神经毒性，发现Ｔｉ０２纳米颗粒以团簇的形式存在于小胶质细胞胞质中，引起线粒体的肿胀。通过荧光和化学发光探针检测活性氧物质（ｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓ，ＲＯＳ）的发生，发现Ｔｉ０２纳米颗粒通过干扰线粒体的电子呼吸链产生氧化爆发，从而导致线粒体的损伤。ＣｈｅｎＭ等１７９】的研究表明未经修饰的Ｓｉ０２颗粒（４０＂－７０ｈｍ）能够进入细胞核，诱导核基质中ＤＮＡ拓扑异构酶异常聚集和蛋白聚集物如泛素、蛋白酶体、多聚谷氨酰胺等的形成。关于纳米材料产生毒性效应的机制，目前体内和体外的研究普遍认为是活性氧物质（ＲＯＳ）的产生和氧化应激反应［９２－Ｓ４Ｉ。在正常生理状态下，细胞代谢可产生少量ＲＯＳ，容易被体内的抗氧化防御系统如还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）和一些抗氧化酶（ＳＯＤ、ＧＳＨ．Ｐｘ）清除，生物体内活性氧自由基的产生和清除处于相对动态平衡中，但在机体遭受各种有害刺激时，体内活性氧自由基产生的速度超出了机体清除自由基的能力，就会引起氧化损伤。ＮｅｌＡ等【舵１认为大多数纳米材料表现出毒性是由于其表面的活性位点能与氧分子发生作用，形成超氧阴离子，并中山大学硕士学位论文通过歧化反应产生过量的ＲＯＳ，导致组织和细胞氧化损伤。ＫｏｕｒｉｅＪＩ等［８５】研究表明ＲＯＳ的产生和氧化应激反应能够氧化质膜和内质网膜上Ｃａ．ＡＴＰ酶的一些巯基基团或影响细胞膜的钙离子通道和钙结合蛋白，调控细胞内Ｃａ信号，导致细胞内核转录因子的激活和机体的炎症反应。ＬｉＮ等【８４】比较了不同尺寸的大气颗粒物诱导肺泡巨噬细胞和上皮细胞ＲＯＳ的产生及氧化应激反应的能力，发现与细颗粒相比，超细颗粒（＜Ｏ．１ｒｔｍ）导致更明显的细胞内血红素氧合酶的升高和谷胱甘肽的消耗。纳米颗粒的亲水／疏水性、表面电荷和粒径、纳米颗粒表面修饰等，都会改变纳米颗粒与生物体的相互作用，不仅影响纳米颗粒在体内及细胞内的分布，而且对其生物毒性也有很大影响，改变这些因素就可以调控纳米材料的生物毒理学行为。降低含钆纳米材料生物毒性的方法包括：先对钆离子修饰后再制备成纳米颗粒，或者，对纳米颗粒进行包裹，制备成核／壳（Ｃｏｒｅ．ｓｈｅｌｌ）结构的纳米材料【８６，８７１及通过优化合成条件【ｓ８１调节纳米颗粒至合适的大小或对纳米颗粒表面进行适当的修饰等。ＤｅｒｆｕｓＡＭ等【８９］ｆｆ口ＨｅＸ等【９０１指出纳米微粒的表面经过适当修饰其毒性可以得到降低。到目前为止，ＳＰＩＯ纳米颗粒一直是唯一的临床使用的纳米磁共振成像造影剂，菲立磁是最早进入临床应用的ＳＰＩＯ类造影剂，其使用剂量为１５ｐ，ｍｏｌＦｅ／ｋｇ，用５０％葡萄糖１００ｍＥ稀释，３０ｍｉｎ内静脉滴注完毕，有效强化时间达４～６ｈｔ叭】。我们制备的含钆纳米颗粒参照该给药方式，稀释后缓慢静脉滴注给药，可望解决高浓度纳米颗粒团注，纳米颗粒聚集所致的血栓形成、栓塞血管的潜在危险的问题。４．３含钆纳米材料的磁共振成像效果及其应用前景初步动物成像实验表明，该含钆纳米造影剂静脉注射后，在血管内滞留较长时间，其在血液中滞留时间显著长于常规造影剂Ｇｄ．ＤＴＰＡ，后者时间约为５分钟，随后很快被肾脏清除６，７１。因此，利用该新型钆纳米造影剂较长滞留时间的特征，适合于作为一种新型的血池造影剂应用于磁共振血管成像。同时，我们观察到，给药量为Ｏ．０１６ｍｍｏｌＧｄ／ｋｇ左右已获得满意的血管ＭＲ成像效果，远低于Ｇｄ．ＤＴＰＡ的临床用量Ｏ．１—０．２ｒｎｒｎｏｌＧｄ／ｋｇ。Ｇｄ．ＭＣＭ．４１成像效果较好，我们推测有２方面原因：①较高的弛豫率，②在血管内滞留时间较长。大部分纳米颗粒静脉注射后，能够迅速被肝脏、脾脏等网状内皮系统（ＲＥＳ）中山大学硕士学位论文中的巨噬细胞所吞噬１６３１。纳米载药系统在体内的分布主要依赖于两个参数：粒子表面性质和粒子大，ｊ，ｔ－Ｊ。纳米颗粒表面性质，如亲水性／亲脂性，是微粒在体液中吸附调理蛋白的决定因素，一般来说，表面亲脂性越大，对调理蛋白（调理素）的结合力越强，这些调理素在纳米粒表面上的吸附过程称为调理作用，它是纳米粒和吞噬细胞发生作用的桥梁，结果吞噬细胞对其吞噬作用也越强。ＡｌｌｅｍａｎｎＥ等【９３】在人血浆和血清里培养聚乳酸纳米粒时，发现被吸附在纳米粒表面上的主要蛋白是抗体ＩｇＧ以及白蛋白、脱辅基脂蛋白．Ｅ。其他研究者在研究蛋白质在聚苯乙烯纳米粒上的吸附动力学时，证实在高度稀释的血浆（０．０８％～０．８％）里白蛋白和纤维蛋白原被吸附在纳米粒表面上。蛋白和纳米粒之间的相互作用与纳米粒的制备方法也有关。例如，与ｗ／ｏ／ｗ乳化技术制备的粒子相比，脱辅基脂蛋白在喷雾干燥的ＰＬＧＡ和ＰＬＡ纳米粒的吸附量高得多。在聚合物中，亲水性聚氧乙烯链的存在同单纯的聚酯相比大大减少了蛋白的吸附。研究还证实了蛋白吸附量与纳米粒在体内循环之间存在相关性，以ＰＥＧ的二嵌段和多嵌段共聚物为模型，随着蛋白吸附的减少，纳米粒表现出长循环的特性，说明纳米粒被肝脏摄取的量降低了，而这又与ＰＥＧ的相对分子质量和表面密度有关【９４】。调理过程可能和纳米颗粒的表面曲率有很大关系，颗粒较小者吸附蛋白或调理素较少，从而减少吞噬细胞的摄取【９５】。增加微粒表面结构的亲水性或减小粒径可以减少调理吸附，而延长纳米载药系统在血液中的半衰期，调整药物在体内的分布。微粒应尽可能小，以避免静脉注射后被毛细血管过滤，但并不是纳米粒的粒径愈小，其体内循环时间愈长，在粒径小于７０ｎｍ时，胶体微粒在肝脏的聚集现象已十分明显，这可能与粒径较小渗透性增强有关。在构建体内长循环纳米粒时较好的粒径范围为７０ｎｍ，－－－，２００ｎｍｉ９６Ｉ。具有长循环特性的纳米粒的表面改性主要采用以下２种方法：①用亲水性聚合物或表面活性剂修饰其表面；②直接应用具有亲水性链段的可生物降解共聚物。目前应用比较广泛的一些表面修饰材料有：聚乙二醇、聚氧乙烯（ＰＥＯ）、聚氧乙烯醚、聚氧乙烯酯、泊洛沙玛等。聚乙二醇（ＰＥＧ）和聚氧乙烯修饰的纳米粒。由ＰＥＧ修饰的纳米粒引起了人们的广泛关注。其中一步法制备ＰＥＧ修饰的纳米粒，所用原料是两亲性ＰＥＧ．聚酯二嵌段共聚物。这种修饰层避免了纳米粒被吞噬细胞内吞。其保护作用取决中山大学硕士学位论文于ＰＥＧ的密度和相对分子质量大小。ＰＥＧ在某些载体上，如脂质体、纳米粒、胶束上的保护作用，有一种假设机理：接枝在聚合物表面上的柔顺的、亲水链段形成了浓密的“构象云”，阻止了聚合物之间的相互作用。Ｇｏｖｅｎｄｅｒ等ｃ９７１用纳米沉淀技术制备了水溶性药物吉羟酸普鲁卡因的ＰＬＡ／ＰＥＧ纳米粒，这些纳米粒对人纤维原细胞的体外细胞毒性并不十分明显。在纳米粒表面上，ＰＥＧ的含量（即ＰＥＧ链之间的距离）对位阻斥力是很重要的。另外，ＰＥＧ链之间的距离可以影响血浆蛋白的吸附，例如，ＰＥＧ链之间的距离从６．２ｎｌＴｌ减少到５．１ａｍ，可使脱辅基脂蛋白的吸附降低９０％。这进一步证实纳米粒表面上亲水段的浓度在调理作用中的重要性。然而，当ＰＥＧ链段之间的距离进一步减少时，并没有显示出对血浆蛋白的吸附有重要的影响。这说明ＰＥＧ链之间的距离对于避免血浆蛋白的吸附有一个临界值。图４．１是ＰＥＧ表面浓度对调理作用的影响示意刚９８１。近年来，人们对聚氧乙烯表面改性体系更加关注，与ＰＥＧ改性体系相类似，由ＰＬＡ和ＰＬＡ．ＰＥＯ共聚物共混制备的纳米粒，通过调节ＰＥＯ链长和表面浓度也可以避免单核吞噬细胞系统（Ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｐｈａｇｏｃｙｔｅｓｙｓｔｅｍ，ＭＰＳ）的摄取。在用二嵌段ＰＬＡ／ＰＥＯ共聚物研究粒子表面ＰＥＯ密度对粒子摄取的影响时，发现随着纳米粒表面上ＰＥＯ的浓度增大，被摄取的粒子减少，这主要归因于蛋白质对粒子表面的位阻斥力增大【９４】。如前所述，顺磁性造影剂的Ｔ１缩短效应要求水分子的氢核要尽可能地接近磁性微粒的磁性部分，对于含钆纳米颗粒即Ｇｄ３＋，以达到弛豫增强的目的。所以在应用表面修饰材料（如ＰＥＧ）对含钆纳米颗粒进行表面修饰时，必须选择合适分子量大小的ＰＥＧ以及合适的用量，使ＰＥＧ链之间的距离不致太大，能够提供有效的位阻斥力以提高其分散性，以及减少血浆蛋白的吸附，又不致太小以致屏蔽了纳米颗粒的介孔通道，而影响水分子的自由通过（水分子直径约０．４ｎｍ）。我们的研究发现用ＰＥＧ．４０００效果较好。静脉注射含钆纳米颗粒２２．０９６ｍｇ／ｋｇ（Ｏ．０１６ｍｍｏｌＧｄ／ｋｇ）后１ｈ，在Ｔ１加权像上鼻咽癌ＣＮＥ．２裸鼠移植瘤仍呈现高信号，说明我们制备粒径在１００ｎｍ左右的钆纳米Ｇｄ．ＭＣＭ．４１，可以透过肿瘤组织不完整的血管内皮间隙，在肿瘤组织内局部聚集。该假设被随后的肿瘤组织电镜观察结果所证实，肿瘤组织电镜观察到，钆纳米颗粒不仅在肿瘤间质分布，同时在肿瘤细胞内观察到较多纳米颗粒，上述结果，为该新型纳米造影剂作为肿瘤靶向诊断探针的载体提供了坚实的实验中山大学硕士学位论文证据。肿瘤组织主要由三部分组成：血管、间隙和细胞。由于肿瘤血管的生成呈持续、失控性的过程，肿瘤新生血管出现迅速，生长快，并呈持续性，是一种失去正常控制的无序状态，与正常血管相比，肿瘤新生血管的结构缺乏完整性，管壁薄弱，缺乏平滑肌及完整的基底膜结构。内皮细胞之间存在较大缝隙，通透性强，用不同大小空间稳定脂质体和乳胶小珠测得不同肿瘤微血管的最大孔隙为３８０＂７００ｎｍ。肿瘤血管网结构紊乱，有大量的血管盲端、动静脉间短路及血管的局部膨出等，导致渗出增加。肿瘤间隙主要由胶原蛋白和弹性纤维网格组成，其中分布的主要是间隙液和大分子成分，它们形成一种亲水性介质。纳米颗粒通过扩散或流动，可由高通透性的肿瘤血管外渗到肿瘤间隙，由于间隙的胶原蛋白和弹性纤维网格结构，相对于小分子，纳米颗粒被保留在间隙中，即增强通透性和保留效应，导致在肿瘤组织中积聚１９们，从而达到纳米颗粒在肿瘤组织的被动靶向。和被动靶向载药系统相比，主动靶向可以将载药系统输运到其修饰前难以到达的部位。这要解决两个关系问题：①对于载药系统的制备，要求制备出亲水性强的表面结构、大小合适，延长在血液中的半衰期；②在微粒载药系统表面连接靶向配体，使载药粒子可以靶向特定的细胞。对于主动靶向载药系统微粒，亲水性表面的功能性基团的选择对于哪种配体可以结合是必要的。ＭａｃＡｄａｍＡＢ等【１００】研发了一种白蛋白微球的制备方法，使微球表面带有羧基或氨基基团，从而可以和配体反应连接。为了使药物靶向到病灶部位，除了粒子表面可阻止调理化的亲水空间屏蔽层外，纳米微粒系统需要装备药物靶向配体，对于纳米系统，大多数的药物靶向配体是抗体【１０１—０３１。ＳａｎｔｒａＳ等将白血病细胞识别的抗体固定到荧光基团掺杂纳米硅材料，然后利用光学显微成像技术对白血病细胞进行鉴别，发现使用这些抗体涂层纳米粒子鉴别白血病细胞十分容易、清楚、高效。而本研究中相同剂量（Ｏ．０１６ｍｍｏｌＧｄ／ｋｇ）的常规造影剂Ｇｄ．ＤＴＰＡ静脉注射后裸鼠肝肾及裸鼠移植瘤未见明显强化，可能与使用造影剂浓度过低（远低于临床用量０．１～０．２ｍｍｏｌＧｄ／ｋｇ），以及因其水溶性在体内中迅速为肾脏清除有关。我们制备的含钆纳米颗粒在血液中滞留时间长（超过ｌｈ）、清除率低，增加了其在肿瘤组织局部聚集的几率。因此，该纳米造影剂经过表面修饰引入活性基团（如中山大学硕士学位论文．ＮＨ２），标记靶向分子，如肿瘤血管内皮靶向分子Ｑ、，Ｄ３整合素的配体【８６１，利用其较长的血管滞留时Ｉ＇Ｒ】，可望进一步提高其在肿瘤局部的富集率，从而为新型高敏感性的肿瘤分子诊断探针的研发提供了基础。中山大学硕士学位论文第五章结论５．１本研究成功制备一种新型、高弛豫率含钆纳米材料Ｇｄ．ＭＣＭ．４１。５．２该纳米材料主要分布于肝、脾、肺、肿瘤组织，肾、心、脑组织未见分布。５．３该纳米材料生物毒性是因团注时，瞬时浓度过高，颗粒之间相互聚集，并引发血管内凝血堵塞血管所致，并非游离Ｇｄ”毒性。５．４该纳米材料悬浮液磁共振成像显示给药后１ｈ血管仍有强化，表明纳米材料可望作为一种新型的血池造影剂。同时，该纳米材料经表面修饰、多种配体标记，可望研发一类全新的分子靶向显像探针，在分子影像诊断及分子治疗中发挥作用。中山大学硕士学位论文参考文献【１】ＬａｕｔｅｒｂｕｒＰＣ．Ｉｍａｇｅｆｏｒｍａｔｉｏｎｂｙｉｎｄｕｃｅｄｌｏｃａｌｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ．Ｅｘａｍｐｌｅｓｅｍｐｌｏｙｉｎｇｎｕｃｌｅａｒｍａｇｎｅｔｉｃｒｅｓｏｎａｎｃｅ．Ｎａｔｕｒｅ．１９７３，２４２（５３９４）：１９０—１９１．［２】黄其流．临床磁共振成像．２版．北京：人民卫生出版社，１９９１．５５—５８．［３］ＣａｒａｖａｎＰ’Ｅ１１ｉｓｏｎＪＪ，ＭｃＭｕｒｒｙＴＪ，ｅｔａ１．Ｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ（１１１）ＣｈｅｌａｔｅｓａｓＭ融ＣｏｎｔｒａｓｔＡｇｅｎｔｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｄｙｎａｍｉｃｓ，ａｎｄＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．ＣｈｅｍＲｅｖ．１９９９，９９（９）：２２９３—２３５２．【４】ＯｋｕｈａｔａＹ．ＤｅｌｉｖｅｒｙＤｒｕｇＤｅｌｉｖｏｆｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａｇｅｎｔｓｆｏｒｍａｇｎｅｔｉｃｒｅｓｏｎａｎｃｅｉｍａｇｉｎｇ．ＡｄｖＲｅｖ．１９９９，３７（１－３）：１２１－１３７．Ｊ，ＮｉｅｎｄｏｒｆＨＰ，Ｋｒｅｓｔｉｎ［５】ＨａｕｓｔｅｉｎＧｅｔａ１．Ｒｅｎａｌｔｏｌｅｒａｎｃｅｏｆｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ－ＤＴＰＡ／ｄｉｍｅｇｌｕｍｉｎｅｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｃｈｒｏｎｉｃｒｅｎａｌｆａｉｌｕｒｅ．ＩｎｖｅｓｔＲａｄｉ０１．１９９２．２７（２）：１５３－１５６．【６】ＳｔｒｉｃｈＧＨａｇａｎｒｅｓｏｎａｎｃｅＰＬ，ＧｅｒｂｅｒＫＨ，ｅｔａ１．Ｔｉｓｓｕｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎａｎｄｍａｇｎｅｔｉｃｓｐｉｎｌａｔｔｉｃｅｒｅｌａｘａｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｓｏｆｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ－ＤＴＰＡ．Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ．１９８５，１５４（３）：７２３—７２６．［７】ＨａｒｐｕｒＥＳ，ＷｏｒａｈＤ，ＨａｌｓＰＡ，ｅｔａ１．Ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌｓａｆｅｔｙａｓｓｅｓｓｍｅｎｔａｎｄｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓｏｆｇａｄｏｄｉａｍｉｄｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎ，ａｎｅｗｍａｇｎｅｔｉｃｒｅｓｏｎａｎｃｅｉｍａｇｉｎｇｃｏｎｔｒａｓｔａｇｅｎｔ．ＩｎｖｅｓｔＲａｄｉ０１．１９９３．２８Ｓｕｐｐｌ１：Ｓ２８—４３．【８】ＭａｔｓｕｏＭ，ＫａｎｅｍａｔｓｕＭ，Ｉｔｏｈｋｅｔａ１．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｍａｌｉｇｎａｎｔｈｅｐａｔｉｃｔｍｎｏｒｓ：ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ－ａｎｄｆｅｒｕｍｏｘｉｄｅ—ｅｎｈａｎｃｅｄＭＲｉｍａｇｉｎｇ．ＡＪＲＡｍＪＲｏｅｎｔｇｅｎ０１．２００１，１７７（３）：６３７—６４３．【９】９ＡｄｚａｍｌｉＩＫ，ＧｒｂｓＨ，ＪｏｈｎｓｏｎＤ，ｅｔａ１．ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓｏｆｇａｄｏｌｉｎｉｕｍｃｈｅｌａｔｅｓｆｏｒＮＭＲｉｍａｇｉｎｇｏｆｃａｌｃｉｆｉｅｄｓｏｆｔｔｉｓｓｕｅｓ．ＪＭｅｄＣｈｅｍ．１９８９，３２（１）：１３９－１４４．【１０］ＪｕｎｇＣＷ，ＪａｃｏｂｓＰ．ＰｈｙｓｉｃａｌｏｘｉｄｅＭＲｃｏｎｔｒａｓｔａｎｄｃｈｅｍｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｓｕｐｅｒｐａｒａｍａｇｎｅｔｉｃｉｒｏｎａｇｅｎｔｓ：ｆｅｒｕｍｏｘｉｄｅｓ，ｆｅｒｕｍｏｘｔｒａｎ，ｆｅｒｕｍｏｘｓｉｌ．ＭａｇｎＲｅｓｏｎＩｍａｇｉｎｇ．１９９５，１３（５）：６６１－６７４．【１１】ＧｒａｚｉｏｌｉＬ，ＢｏｎｄｉｏｎｉＭＰ，ＲｏｍａｎｉｎｉＬ，ｅｔ５５５ａ１．Ｓｕｐｅｒｐａｒａｍａｇｎｅｔｉｃｉｒｏｎｏｘｉｄｅ·ｅｎｈａｎｃｅｄｌｉｖｅｒＭ砌ｗｉｔｈＳＨＵ２７Ａ（ＲＥＳＯＶＩＳＴ）：Ｎｅｗｐｒｏｔｏｃｏｌ中山大学硕士学位论文ｉｎｆｕｓｉｏｎｔｏｉｍｐｒｏｖｅａｒｔｅｒｉａｌｐｈａｓｅｅｖａｌｕａｔｉｏｎ～ａｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅｓｔｕｄｙ．ＪＭａｇｎＲｅｓｏｎＩｍａｇｉｎｇ．２００９，２９（３）：６０７·６１６．【１２］ＨａｒｉｓｉｎｇｈａｎｉＭＧｏｃｃｕｌｔＢａｒｅｎｔｓｚＪ，ＨａｈｎＰＦ，ｅｔａ１．Ｎｏｎｉｎｖａｓｉｖｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｃｌｉｎｉｃａｌｌｙｌｙｍｐｈ－ｎｏｄｅｍｅｔａｓｔａｓｅｓｉｎｐｒｏｓｔａｔｅｃａｎｃｅｒ．ＮＥｎｇｌＪＭｅｄ．２００３，３４８（２５）：２４９１－２４９９．［１３】ＬａｕｒｅｎｔＳ，ＦｏｒｇｅＤ，ＰｏｒｔＭ，ｅｔａ１．Ｍａｇｎｅｔｉｃｉｒｏｎｏｘｉｄｅｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ：ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ，ｖｅｃｔｏｒｉｚａｔｉｏｎ，ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｓ，ａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．ＣｈｅｍＲｅｖ．２００８，１０８（６）：２０６４－２１１０．［１４】ＢｕｌｔｅＪｗ，ＫｒａｋｃｈｍａｎｃｅｌｌｕｌａｒＤＬ．ＩｒｏｎｏｘｉｄｅＭＲｃｏｎｔｒａｓｔａｇｅｎｔｓｆｏｒｍｏｌｅｃｕｌａｒａｎｄｉｍａｇｉｎｇ．ＮＭＲＢｉｏｍｅｄ．２００４，１７（７）：４８４—４９９．Ｓｅｏ【１５】ＪｕｎＹＷＪｗ，ＣｈｅｏｎＪ．Ｎａｎｏｓｃａｌｉｎｇｌａｗｓｏｆｍａｇｎｅｔｉｃｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓａｎｄｔｈｅｉｒａｐｐｌｉｃａｂｉｌｉｔｉｅｓｉｎｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｓｃｉｅｎｃｅｓ．ＡｃｅＣｈｅｍＲｅｓ．２００８，４１（２）：１７９．１８９．［１６】ＬｕＣＷ，ＨｕｎｇＹＨｓｉａｏ吣ｅｔａ１．ＢｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌＵ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｍａｇｎｅｔｉｃｓｉｌｉｃａｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｆｏｒｈｉｇｈｌｙｅｆｆｉｃｉｅｎｔｈｕｍａｎｓｔｅｍｃｅｌｌｌａｂｅｌｉｎｇ．ＮａｎｏＬｅｔｔ．２００７，７（１）：１４９．１５４．ｉｍａｇｉｎｇ．Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ．２００１，［１７】ＷｅｉｓｓｌｅｄｅｒＩｔ，Ｍａｈｍｏｏｄ２１９（２）：３１６．３３３．［１８】ＪａｉｌｅｒＦＡ，ＷｅｉｓｓｌｅｄｅｒＲ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ２９３（７）：８５５－８６２．［１ｉｍａｇｉｎｇｉｎｔｈｅｃｌｉｎｉｃａｌａｒｅｎａ．２００５，９］勋ｎｇＫ，ＣｈｏｉＪ，ＮａｍＪＨ，ｅｔａ１．Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｃｈｅｍｉｃａｌｌｙａｓａｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｚｅｄｓｉｌｉｃａ－ｃｏａｔｅｄｍａｇｎｅｔｉｃｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓＣｈｅｍＢ．２００９，１ＤＮＡｓｅｐａｒａｔｏｒ．ＪＰｈｙｓ１３（２）：５３６－５４３．【２０】ＣｈｏｉＪＳ，ＰａｒｋＪＣ，ＮａｈＨ，ｅｔａ１．Ａｈｙｂｒｉｄｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｐｒｏｂｅｆｏｒｄｕａｌ－ｍｏｄａｌｉｔｙｐｏｓｉｔｒｏｎｅｍｉｓｓｉｏｎｔｏｍｏｇｒａｐｈｙａｎｄｍａｇｎｅｔｉｃｒｅｓｏｎａｎｃｅｉｍａｇｉｎｇ．ＡｎｇｅｗＣｈｅｍＩｎｔＥｄＥｎ９１．２００８，４７（３３）：６２５９．６２６２．【２１】ＹｕｎＨＳ，ＫｉｍＳＥ，ＨｙｕｎＶＹ，ｅｔａ１．Ｈｉｅｒａｒｃｈｉｃａｌｌｙｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓ－ｍａｅｒｏｐｏｒｏｕｓｂｉｏａｅｔｉｖｅｇｌａｓｓｅｓｓｃａｆｆｏｌｄｓｆｏｒｂｏｎｅｔｉｓｓｕｅｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ．ＪＢｉｏｍｅｄＡｐｐｌＭａｔｅｒＲｅｓＢＢｉｏｍａｔｅｒ．２００８，８７（２）：３７４－３８０．Ｄ．Ｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓ【２２】ＶａＵｅｔ—ＲｅｇｉＭ，ＢａｌａｓＦ，ＡｒｃｏｓＣｈｅｍＩｎｔＥｄｍａｔｅｒｉａｌｓｆｏｒｄｒｕｇｄｅｌｉｖｅｒｙ．ＡｎｇｅｗＥｎ９１．２００７，４６（４０）：７５４８．７５５８．ＱＣｈｅｕｎｇＪＳ，ｅｔ【２３】ＧａｏＪ，Ｌｉａｎｇａ１．Ｍｕｌｔｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ２Ｒｙｏｌｋ－ｓｈｅｌｌｎａｎｏｐａｒｔｉｅｌｅｓ：ａ中山大学硕士学位论文ｐｏｔｅｎｔｉａｌＭＲｊｃｏｎｔｒａｓｔａｎｄａｎｔｉｃａｎｃｅｒａｇｅｎｔ．ＪＡｍＣｈｅｍＳｏｃ．２００８．１３０（３５）：１１８２８—１１８３３［２４］ＢｒｉｎｋｅｒＣＪ．Ｐｏｒｏｕｓｉｎｏｒｇａｎｉｃｍａｔｅｒｉａｌｓ．ＣｕｒｒｅｎｔＳｃｉｅｎｃｅ．，１９９６ＯｐｉｎｉｏｎｉｎＳｏｌｉｄＳｔａｔｅａｎｄＭａｔｅｒｉａｌｓ１（６）：７９８—８０５ｗＪ，ｅｔａ１．Ｏｒｄｅｒｅｄｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓｍｏｌｅｃｕｌａｒ［２５］ＫｒｅｓｇｅＣＴ，ＬｅｏｎｏｗｉｃｚＭＥ，Ｒｏｔｈａｓｉｅｖｅｓｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｄｂｙ７１０．７１２ｌｉｑｕｉｄｅｒｙｓｔａｌｔｅｍｐｌａｔｅｍｅｃｈａｎｉｓｍ．Ｎａｔｕｒｅ．１９９２，３５９：［２６］ＢｅｅｋＪＳ，ＶａｒｔｕｌｉＪＣ，ＲｏｔｈＷＪ，ｅｔａ１．ＡｎｅｗｆａｍｉｌｙｏｆｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓｍｏｌｅｃｕｌａｒｓｉｅｖｅｓＰｒｅｐａｒｅｄｗｉｔｈｌｉｑｕｉｄｃｒｙｓｔａｌｔｅｍｐｌａｔｅｓ．１９９２，１１４（２７）：１０８３４－１０８４３［２７］孙永军．介孔材料的研究进展．山东建筑大学学报．２００９，２４（４）：３６２。３６８．［２８］ＣｏｒｍａＡ，ＭａｒｔｉｎｅｚＡ，ＭａｒｔｉｎｅｚｓｏｒｉａＶ，ｅｔｏｎａ１．ＨｙｄｒｏｃｒａｃｋｉｎｇｏｆＶａｃｕｕｍＧａｓｏｉｌｔｈｅＮｏｖｅｌＭｅｓｏｐｏｒｏｕｓＭＣＭ一４１ＡｌｕｍｉｎｏｓｉｌｉｃａｔｅＣａｔａｌｙｓｔ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣａｔａｌｙｓｉｓ．１９９５，１５３（１）：２５—３１［２９］ＢｌａｓｃｏＴ，ＣｏｒｍａＡ，ＮａｖａｒｒｏＭＴ，ｅｔａ１．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ，ａｎｄＣａｔａｌｙｔｉｃＡｃｔｉｖｉｔｙｏｆＴｉ－ＭＣＭ一４１Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣａｔａｌｙｓｉｓ．１９９５，１５６（１）：６５—７４ｅｔ［３０］ＡｄｈｙａｐａｋＰＶ，ＫａｒａｎｄｉｋａｒＰ，ＶｉｊａｙａｍｏｈａｎａｎＫｎａｎｏｗｉｒｅｓｉｎｓｉｄｅｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓＭＣＭ－４１ａ１．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｓｉｌｖｅｒｈｏｓｔ．ＭａｔｅｒｉａｌｓＬｅｔｔｅｒｓ．２００４，５８（７—８）：１１６８－１１７１［３１］ＢｏｒｅＭＴ，ＰｈａｍＨＮ，ＳｗｉｔｚｅｒＥＥ，ｅｔａ１．ＴｈｅｒｏｌｅｏｆｐｏｒｅｓｉｚｅａｎｄｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｎｔｈｅＢ．ｔｈｅｒｍａｌｓｔａｂｉｌｉｔｙｏｆｇｏｌｄｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｗｉｔｈｉｎｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓｓｉｌｉｃａ．ＪＰｈｙｓＣｈｅｍ２００５，１０９（７）：２８７３—２８８０．［３２】ＲｏｙＩ，ＯｈｕｌｃｈａｎｓｋｙｙＴＹ，ＰｕｄａｖａｒＨＥ，ｅｔａ１．Ｃｅｒａｍｉｃ—ｂａｓｅｄｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｗａｔｅｒ—ｉｎｓｏｌｕｂｌｅｓｙｓｔｅｍｆｏｒｅｎｔｒａｐｐｉｎｇｄｒｕｇ－ｃａｒｒｉｅｒｐｈｏｔｏｓｅｎｓｉｔｉｚｉｎｇａｎｔｉｃａｎｃｅｒＡｍｄｒｕｇｓ：ａＣｈｅｍｎｏｖｅｌｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃｔｈｅｒａｐｙ．ＪＳｏｃ．２００３，１２５（２６）：７８６０－７８６５．【３３］ＲｈｙｎｅｒＭＮ，ＳｍｉｔｈＡＭ，ＧａｏＸ，ｅｔａ１．Ｑｕａｎｔｕｍｄｏｔｓａｎｄｍｕｌｔｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｍａｇｉｎｇ．Ｎａｎｏｍｅｄｉｃｉｎｅ（Ｌｏｎｄ）．ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ：ｎｅｗｃｏｎｔｒａｓｔａｇｅｎｔｓｆｏｒｔｕｍｏｒ２００６，１（２）：２０９—２１７．【３４］ＴａｙｌｏｒＫＭ，ＫｉｍＪＳ，ＲｉｅｔｅｒＷＪ，ｅｔａ１．ＭｅｓｏｐｏｒｏｕｓｓｉｌｉｃａｎａｎｏｓｐｈｅｒｅｓａｓｈｉｇｈｌｙｅｆｆｉｃｉｅｎｔＭⅪｃｏｎｔｒａｓｔａｇｅｎｔｓ．ＪＡｍＣｈｅｍＳｏｃ．２００８，１３０（７）：２１５４．２１５５．２９！些奎堂堡主堂垡笙茎【３５］ＣａｍｉａｔｏＦ，ＴｅｉＬ，ＤａｓｔｒｕＷｅｔａ１．ＲｅｌａｘｉｖｉｔｙｍｏｄｕｌａｔｉｏｎｉｎＧｄ－ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｓｅｄｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓｓｉｌｉｃａｓ．ＣｈｅｍＣｏｍｍｕｎ（Ｃａｍｂ）．２００９，１４（１０）：１２４６·１２４８．ｈｙｂｒｉｄｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｆｏｒ【３６】ＫｉｍＪＳ，ＲｉｅｔｅｒＷＪ，ＴａｙｌｏｒＫＭ，ｅｔａ１．Ｓｅｌｆ－ａｓｓｅｍｂｌｅｄｃａｎｃｅｒ－ｓｐｅｃｉｆｉｃｍｕｌｔｉｍｏｄａｌｉｍａｇｉｎｇ．ＪＡｍＣｈｅｍＳｏｃ．２００７．１２９（２９）：８９６２－８９６３．ａ【３７】ＨｓｉａｏＫＴｓａｉｃＰ，ＣｈｕｎｇＴＨ，ｅｔａ１．Ｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓｓｉｌｉｃａｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓａｓｄｅｌｉｖｅｒｙｓｙｓｔｅｍｏｆｇａｄｏｌｉｎｉｕｍｆｏｒｅｆｆｅｃｔｉｖｅｈｕｍａｎｓｔｅｍｃｅｌｌｔｒａｃｋｉｎｇ．Ｓｍａｌｌ．２００８，４（９）：１４４５－１４５２．［３８】ＢａｅＫＨ，ＫｉｍＹＢ，ＬｅｅＹｅｔａ１．ＢｉｏｉｎｓｐｉｒｅｄＳｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆＧａｄｏｌｉｎｉｕｍ－ＬａｂｅｌｅｄＭａｇｎｅｔｉｔｅＮａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｆｏｒＤｕａｌＣｏｎｔｒａｓｔＴ（１）－ａｎｄＲｅｓｏｎａｎｃｅＴ（２）·ＷｅｉｇｈｔｅｄＭａｇｎｅｔｉｃ【３９】ＲｉｅｔｅｒＷＪ，ＫｉｍＩｍａｇｉｎｇ．ＢｉｏｃｏｎｊｕｇＣｈｅｍ．２０１０．ＪＳ，ＴａｙｌｏｒＫＭ，ｅｔａ１．Ｈｙｂｒｉｄｓｉｌｉｃａｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｆｏｒｍｕｌｔｉｍｏｄａｌｉｍａｇｉｎｇ．ＡｎｇｅｗＣｈｅｍＩｎｔＥｄＥｎ９１．２００７，４６（２０）：３６８０—３６８２．［４０］刘立志，郭刚军，曾木生，等．含钆纳米材料磁共振分子影像造影剂的研制．中华医学杂志．２００７，８７（４）：２４０．２４３［４１】梁艳，张劲松，张军旗．单分散纳米介孔二氧化硅的制备．材料研究学报．２００４，１８（２）：１４９·１５４［４２】ＬｉｎＹＳ，ＨｕｎｇＹＳｕＪＫ，ｅｔａ１．Ｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ（１１１）－ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄｒｅｓｏｎａｎｃｅｎａｎｏｓｉｚｅｄｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓｓｉｌｉｃａａｓｐｏｔｅｎｔｉａｌｍａｇｎｅｔｉｃｉｍａｇｉｎｇｃｏｎｔｒａｓｔａｇｅｎｔｓ．２００４，１０８（４０）：１５６０８－１５６１１［４３】ＹａｎｇＨ＇ＣｏｏｍｂｓＮ，ＯｚｉｎＧＡ。Ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆｓｈａｐｅｓａｎｄｓｕｒｆａｃｅｐａｔｔｅｒｎｓｉｎｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓｓｉｌｉｃａ．Ｎａｔｕｒｅ．１９９７，３８６（６６２６）：６９２·６９５【４４】ＹａｎｇＨ，ｖｏＶｋＧＣｏｏｍｂｓＮ，ｅｔａ１．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓｓｉｌｉｃａｓｐｈｅｒｅｓｕｎｄｅｒｑｕｉｅｓｃｅｎｔａｑｕｅｏｕｓａｃｉｄｉｃｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．１９９８，８（３）：７４３－７５０【４５】黄继英，梁星原．磁共振成像原理．１版．西安：陕西科学技术出版社，１９９８．１５０．１６８．［４６】徐如人，庞文琴．分子筛与多孔材料化学．１版．北京：科学出版社，２００４．【４７】１ｗａｎａｇａＨ，ＦｕｊｉｉＭ，ＴａｋｅｕｃｈＳ．Ｉｎｔｅｒ－ｌｅｇａｎｇｌｅｓｉｎｔｅｔｒａｐｏｄＺｎＯｐａｒｔｉｃｌｅｓ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｒｙｓｔａｌＧｒｏｗｔｈ．１９９８，１８３（６）：１９０－１９５．［４８】徐辉碧．纳米医药．１版．北京：清华大学出版社，２００４．１１－１２．３０中山大学硕士学位论文［４９】宋晓岚，王海波，吴雪兰，等．纳米颗粒分散技术的研究与发展．化工进展．２００５，２４（１）：４７．５２［５０】许荣玉．固体颗粒的分散．山西化工．２００８，２８（１）：３２—３６［５１】牛永效，王毅，王恩德，等．纳米Ｓｉ０２在水性介质中的分散稳定性研究．粉体纳米技术．２００６，（３）：１．３［５２】ＫａｂａｌｋａＧＷＤａｖｉｓＭＡ，ＨｏｌｍｂｅｒｇＥ，ｅｔａ１．Ｇａｄｏｌｉｎｉｕｍ－ｌａｂｅｌｅｄｌｉｐｏｓｏｍｅｓｃｏｎｔａｉｎｉｎｇａｍｐｈｉｐｈｉｌｉｃＧｄ－ＤＴＰＡｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓｏｆｖａｒｙｉｎｇｃｈａｉｎｌｅｎｇｔｈ：ｔａｒｇｅｔｅｄＭＲＩｃｏｎｔｒａｓｔｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔａｇｅｎｔｓｆｏｒｔｈｅｌｉｖｅｒ．ＭａｇｎＲｅｓｏｎＩｍａｇｉｎｇ．１９９１，９（３）：３７３－３７７．［５３】ＴｉｌｃｏｅｋＣ，ＵｎｇｅｒＥ，ＣｕｌｌｉｓＰ，ｅｔａ１．ＬｉｐｏｓｏｍａｌＧｄ—ＤＴＰＡ：ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎａｎｄｏｆｒｅｌａｘｉｖｉｔｙ．Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ．１９８９，１７１（１）：７７·８０．［５４】王毅翔，沈天真，陈星荣，等．超顺磁性氧化铁胶体用作网状内皮系统磁共振造影剂的实验研究．中国医学影像学杂志，２（３），１９９４．１８１．１８５［５５］Ｐｌａｔａｓ—ＩｇｌｅｓｉａｓＣ，ＶａｎｄｅｒＥＬ，ＺｈｏｕＷａｓｅｔａ１．ＺｅｏｌｉｔｅＧｄＮａＹｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｗｉｔｈｖｅｒｙｈｉｇｈｒｅｌａｘｉｖｉｔｙｆｏｒａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｃｏｎｔｒａｓｔａｇｅｎｔｓｉｎｍａｇｎｅｔｉｃｒｅｓｏｎａｎｃｅｉｍａｇｉｎｇ．Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．２００２．８（２２）：５１２１－５１３１．［５６］许乙凯．磁共振造影剂及临床应用．１版．北京：人民卫生出版社，２００３．３７．［５７］ＨｕａｎｇＣ，ＬｉｕＴ，ＳｕＣ，ｅｔａ１．ＳｕｐｅｒｐａｒａｍａｇｎｅｔｉｃＨｏｌｌｏｗａｎｄＰａｒａｍａｇｎｅｔｉｃＰｏｒｏｕｓＧｄ２０３Ｐａｒｔｉｃｌｅｓ．ＣｈｅｍｉｓｔｒｙｏｆＭａｔｅｒｉａｌｓ．２００８，２０（１２）：３８４０－－３８４８．ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ：［５８］Ｂｒｉｄｏｔ几，ＦａｕｒｅＡＣ，ＬａｕｒｅｎｔＳ，ｅｔａ１．ＨｙｂｒｉｄｇａｄｏｌｉｎｉｕｍｏｘｉｄｅｆｏｒｉｎＶｉｖｏｍｕｌｔｉｍｏｄａｌｃｏｎｔｒａｓｔａｇｅｎｔｓｉｍａｇｉｎｇ．ＪＡｍＣｈｅｍＳｏｅ．２００７，１２９（１６）：５０７６－５０８４．［５９】ＢａｒｂｄＣ，ＢａｒｔｌｅｔｔＪ，ＫｏｎｇＬ，ｅｔａ１．Ｓｉｌｉｃａｐａｒｔｉｃｌｅｓ：ａｎｏｖｅｌｄｒｕｇ—ｄｅｌｉｖｅｒｙｓｙｓｔｅｍ．ＡｄｖａｎｃｅｄＭａｔｅｒｉａｌｓ．２００４，１６（２１）：１９５９—１９６６．Ｓ，ＫｒｅｕｔｅｒＪ，ｅｔａ１．Ｂｏｄｙｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆ７５Ｓｅ—ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ［６０】ＢｏｒｃｈａｒｄｔＧＢｒａｎｄｒｉｓｓｓｉｌｉｃａｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｃｏｖａｌｅｎｔｌｙｃｏａｔｅｄｗｉｔｈｏｍｅｇａ－ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｚｅｄｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓａｆｔｅｒｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓｉｎｊｅｃｔｉｏｎｉｎｒａｔｓ．ＪＤｒｕｇＴａｒｇｅｔ．１９９４．２（１）：６１—７７．ｏｎ［６１】ＭＡＲＧＯＬＩＳＪ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｃｏｌｌｏｉｄａｌｓｉｌｉｃａｂｌｏｏｄｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ．ＡｕｓｔＪＥｘｐＢｉｏｌＭｅｄＳｃｉ．１９６１，３９：２４９—２５８．［６２］ＧｏｖｅｒｎａＭ，ＡｍａｔｉＭ，ＦｅｎｏｇｌｉｏＩ，ｅｔａ１．Ｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙｏｆｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｅｆｆｅｃｔｓｏｆｓｉｌｉｃａｓ：３１中山大学硕士学位论文ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｄｅｇｒｅｅｓｏｆａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｆｉｆｔｈｃｏｍｐｏｎｅｎｔｏｆｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔｂｙａｍｏｒｐｈｏｕｓｓｉｌｉｃａｓ．ＴｏｘｉｃｏｌＡｐｐｌＰｈａｒｍａｃ０１．２００５，２０８（１）：６８－７７．Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ１．ｉｎｃａｎｃｅｒ【６３】ＢｒｉｇｇｅｒＩ，ＤｕｂｅｒｎｅｔＣ，ＣｏｕｖｒｅｕｒＥｔｈｅｒａｐｙａｎｄｄｉａｇｎｏｓｉｓ．ＡｄｖＤｒｕｇＤｅｌｉｖＲｅｖ．２００２，５４（５）：６３１－６５【６４】许海燕，王琛．纳米生物医学技术．１版．北京：中国协和医科大学出版社，２００９．【６５］ＤｒｅｈｅｒＫＬ．Ｈｅａｋｈａｎｄｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌｉｍｐａｃｔｏｆｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃａｌａｓｓｅｓｓｍｅｎｔｏｆｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅｄｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ．ＴｏｘｉｃｏｌＳｃｉ．２００４，７７（１）：３－５．ａｌｖｅｏｌａｒｍａｃｒｏｐｈａｇｅ［６６］ＲｅｎｗｉｃｋＬＣ，ＤｏｎａｌｄｓｏｎｂｙＫＣｌｏｕｔｅｒＡ．Ｉｍｐａｉｒｍｅｎｌ｝ｏｆＡｐｐｌｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉＳｕｌｔｒａｆｉｎｅｐａｒｔｉｃｌｅｓ．ＴｏｘｉｃｏｌＰｈａｒｍａｃ０１．２００１，１７２（２）：１１９—１２７．【６７］ＣｈａｈｐａＤＣ，ＭｏｒｒｏｗｓｕｂｊｅｃｔｓＰＥ，ＯｂｅｒｄｏｒｓｔｅｒＧｅｔａ１．Ｕｌｔｒａｆ＇ｍｅｐａｒｔｉｃｌｅｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎｉｎｗｉｔｈａｓｔｈｍａ．ＥｎｖｉｒｏｎＨｅａｌｔｈＰｅｒｓｐｅｃｔ．２００４，１１２（８）：８７９－８８２．ＦｅｒｉｎＪ，ＬｅｈｎｅｒｔＢＥ．Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｚｅ，ｉｎｖｉｖｏ［６８】ＯｂｅｒｄｏｒｓｔｅｒＧｐａｒｔｉｃｌｅｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ，ａｎｄｌｕｎｇ５：１７３．１７９．ｉｎｊｕｒｙ．ＥｎｖｉｒｏｎＨｅａｌｔｈＰｅｒｓｐｅｃｔ．１９９４，１０２Ｓｕｐｐｌ［６９】ＤｅｌｆｍｏＩＬｌ，ＳｉｏｕｔａｓＣ，ＭａｌｉｋＳ．Ｐｏｔｅｎｔｉａｌｒｏｌｅｏｆｕｌｔｒａｆｒｅｅｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｎａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｓｂｅｔｗｅｅｎａｉｒｂｏｒｎｅｐａｒｔｉｃｌｅｍａｓｓａｎｄｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒｈｅａｋｈ．ＥｎｖｉｒｏｎＨｅａｋｈＰｅｒｓｐｅｃｔ．２００５，１１３（８）：９３４－９４６．【７０】ＯｂｅｒｄｏｒｓｔｅｒＧＦｉｎｋｅｌｓｔｅｉｎＪＮ，ＪｏｈｎｓｔｏｎＣ，ｅｔａ１．Ａｃｕｔｅｐｕｌｍｏｎａｒｙｅｆｆｅｃｔｓｏｆｕｌｔｒａｆｉｎｅｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｎｒａｔｓａｎｄｍｉｃｅ．ＲｅｓＰｅｐＨｅａｌｔｈ７５．８６．ＥｆｔＩｎｓｔ．２０００，（９６）：５－７４；ｄｉｓｃ．［７１】ＳｕｚｕｋｉＫＩｋａｒｉＫＩｍａｉＨ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｏｆｓｉｌｉｃａｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｓｙｓｔｅｍ．ＪＡｍｈａｖｉｎｇａｗｅｌｌ－ｏｒｄｅｒｅｄｍｅｓｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅｕｓｉｎｇｄｏｕｂｌｅｓｕｒｆａｃｔａｎｔＣｈｅｍＳｏｅ．２００４，１２６（２）：４６２－４６３．【７２】ＵｒａｔａＣ，ＡｏｙａｍａＹ，ＴｏｎｅｇａｗａｓｕｒｆａｃｔａｎｔｓｔｏＡ，ｅｔａ１．Ｄｉａｌｙｓｉｓｐｒｏｃｅｓｓｆｏｒｍｅｓｏｐｏｒｏｕｓｓｉｌｉｃａｔｈｅｒｅｍｏｖａｌｏｆｆｏｒｍｃｏｌｌｏｉｄａｌｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ．ＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ．２００９（３４）：５０９４·５０９６［７３】Ｎｅｍｍａｒ八ＨｏｙｌａｅｒｔｓＭＦ，ＨｏｅｔＰＨ，ｅｔａ１．Ｕｌｔｒａｆｉｎｅｐａｒｔｉｃｌｅｓａｆｆｅｃｔｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓｉｎａｎｉｎｖｉｖｏｈａｍｓｔｅｒｍｏｄｅｌ．ＡｍＪＲｅｓｐｉｒＣｒｉｔＣａｒｅ３２Ｍｅｄ．２００２，中山大学硕士学位论文１６６（７）：９９８—１００４．［７４】ＫｈａｎｄｏｇａＡ，ＳｔａｍｐｆｌｎｏｔＡ，ＴａｋｅｎａｋａＳ，ｅｔｏｎａ１．Ｕｌｔｒａｆｉｎｅｐａｒｔｉｃｌｅｓｅｘｅｒｔｐｒｏｔｈｒｏｍｂｏｔｉｃｂｕｔｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｓｔｈｅｈｅｐａｔｉｃｍｉｃｒｏｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎｉｎ３２０—１３２５．ｈｅａｌｔｈｙｍｉｃｅｉｎｖｉｖｏ．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ．２００４，１０９（１Ｏ）：１［７５］Ｔｉｎ—Ｔｉｎ－Ｗｉｎ—Ｓｈｗｅ，ＹａｍａｍｏｔｏＳ，ＡｈｍｅｄＳ，ｅｔａ１．ＢｒａｉｎｃｙｔｏｋｉｎｅａｎｄｃｈｅｍｏｋｉｎｅｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｍｉｃｅｉｎｄｕｃｅｄｂｙｉｎｔｒａｎａｓａｌｉｎ．ｓｔｉｌｌａｔｉｏｎｗｉｔｈｕｌｔｒａｆｒｅｅｃａｒｂｏｎｂｌａｃｋ．ＴｏｘｉｃｏｌＬｅｔｔ．２００６，１６３（２）：１５３－１６０．Ｈ，ｘｉｎｇＱｅｔ［７６】ＣｈｅｎＺ，Ｍｅｎｇａ１．Ａｃｕｔｅｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃａｌｅｆｆｅｃｔｓｏｆｃｏｐｐｅｒｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓｉｎｖｉｖｏ．ＴｏｘｉｃｏｌＬｅｔｔ．２００６，１６３（２）：１０９－１２０．ＧＨ，ｅｔａ１．Ｌｉｆｅ：ＴｈｅＳｃｉｅｎｃｅｏｆＢｉｏｌｏｇｙ．８ｅｄｉｔｉｏｎ．【７７］ＳａｄａｖａＤ，ＨｅｌｌｅｒＨＣ，ＯｒｉａｎｓＨａｒｖｅｙＭｕｄｄＣｏｌｌｅｇｅ：ＷＨＦｒｅｅｍａｎ＆Ｃｏ，２００６．【７８】ＤｏｎａｌｄｓｏｎＫＴｒａｎＬ，ＪｉｍｅｎｅｚＬＡ，ｅｔａ１．Ｃｏｍｂｕｓｔｉｏｎ－ｄｅｒｉｖｅｄｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ：ａｒｅｖｉｅｗｏｆｔｈｅｉｒｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙｆｏｌｌｏｗｉｎｇｉｎｈａｌａｔｉｏｎｅｘｐｏｓｕｒｅ．ＰａｒｔＦｉｂｒｅＴｏｘｉｃ０１．２００５．２：１０．［７９】ＣｈｅｎＭ，ｙｏｎＭＡ．ＦｏｒｍａｔｉｏｎｎｕｃｌｅａｒｆｕｎｃｔｉｏｎｉｎｒｅｓｐｏｎｓｅｏｆｎｕｃｌｅｏｐｌａｓｍｉｃｐｒｏｔｅｉｎａｇｇｒｅｇａｔｅｓｉｍｐａｋｓｔｏＳｉ０２ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ．ＥｘｐＣｅｌｌＲｅｓ．２００５，３０５（１）：５１－６２．【８０】ＬｏｖｒｉｃＪ，ＢａｚｚｉＨＳ，ＣｕｉｅＹｅｔａ１．ＤｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎａｎｄｔｏｘｉｃＲｙｏｆｇｒｅｅｎａｎｄｒｅｄｅｍｉｔｔｉｎｇＣｄＴｅｑｕａｎｔｕｍｄｏｔｓ．ＪＭｏｌＭｅｄ．２００５，８３（５）：３７７—３８５．【８１】ＬｏｎｇＴＣ，ＳａＳｈＮ，ＴｉｋｏｎＲＤ，ｅｔａ１．Ｔｉｔａｎｉｕｍｓｐｅｃｉｅｓｉｎｄｉｏｘｉｄｅ（Ｐ２５）ｐｒｏｄｕｃｅｓｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｉｍｍｏｒｔａｌｉｚｅｄｂｒａｉｎｍｉｃｒｏｇｌｉａ（ＢＶ２）：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｆｏｒｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｎｅｕｒｏｔｏｘｉｃｉｔｙ．ＥｎｖｋｏｎＳｃｉＴｅｃｈｎ０１．２００６，４０（１４）：４３４６—４３５２．【８２】ＮｅｌＡ，ＸｉａＴ，ＭａｄｌｅｒＬ，ｅｔａ１．Ｔｏｘｉｃｐｏｔｅｎｔｉａｌｏｆｍａｔｅｒｉａｌｓａｔｔｈｅｎａｎｏｌｅｖｅｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ．２００６，３１１（５７６１）：６２２．６２７．［８３】Ｕｎｆｉ＇ｉｅｄＫＡｌｂｒｅｃｈｔＣ，ＫｌｏｔｚＬＯ，ｅｔａ１．Ｃｅｌｌｕｌａｒｒｅｓｐｏｎｓｅｓｔｏｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ：Ｔａｒｇｅｔｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ．Ｎａｎｏｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ．２００７，１（１）：５２—７１．ａ１．Ｕｌｔｒａｆ＇ｍｅｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅｐｏｌｌｕｔａｎｔｓｉｎｄｕｃｅｏｘｉｄａｔｉｖｅｄａｍａｇｅ．ＥｎｖｉｒｏｎＨｅａｌｔｈＰｅｒｓｐｅｃｔ．２００３，【８４】ＬｉＮ，ＳｉｏｕｔａｓＣ，Ｃｈｏ八ｅｔｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｓｔｒｅｓｓａｎｄ１１１（４）：４５５—４６０．３３中山大学硕士学位论文【８５】ＫｏｕｒｉｅＪＩ．Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｏｆｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓｗｉｔｈｉｏｎｔｒａｎｓｐｏｒｔｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ．ＡｍＪＰｈｙｓｉ０１．１９９８，２７５（１Ｐｔ１）：Ｃ１－Ｃ２４．［８６］ＫｏｂａｙａｓｈｉａＹｓｉｌｉｃａ－－Ｇｄ－ｓｉｌｉｃａＩｍａｉｂＪ，ＮａｇａｏｂｐａｒｔｉｃｌｅｓＤ，ｅｌ：ａ１．Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｉｒｍａｇｎｅｔｉｃｏｆｍｕｌｔｉｌａｙｅｒｅｄｉｍａｇｅｓ．ｃｏｒｅ－ｓｈｅｌｌｒｅｓｏｎａｎｃｅＣｏｌｌｏｉｄｓａｎｄＳｕｒｆａｃｅｓＡ：ＰｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＡｓｐｅｃｔｓ．２００７，３０８（１－３）：１４－１９［８７］ＪｏｖａｎｏｖｉｃＡＶ，ＦｌｉｎｔＪＡ，ＶａｒｓｈｎｅｙＭ，ｅｔａ１．Ｓｕｒｆａｃｅｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｓｉｌｉｃａｃｏｒｅ·ｓｈｅｌｌｎａｎｏｃａｐｓｕｌｅｓ：ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ．２００６，７（３）：９４５·９４９．［８８］曹渊，白英豪，夏之宁．不同孔径介孔分子筛ＭＣＭ－４１的合成及载药释药性能．硅酸盐学报．２００９，３７（９）：１５７０．１５７４【８９】ＤｅｒｆｕｓＡＭ，ＷＣＷＣ，ＢｈａｔｉａＳＮ．Ｐｒｏｂｉｎｇｔｈｅｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆｓｅｍｉｃｏｎｄｕｃｔｏｒｑｕａｎｔｕｍｄｏｔｓ．ＮａｎｏＬｅｔｔｅｒｓ，２００４，４（１）：１１－１８【９０】ＨｅＸ，ＭａＪ，ＭｅｒｃａｄｏＡＥ，ｅｔａ１．ＣｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆＰａｃｌｉｔａｘｅｌｉｎｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅｓｅｌｆ－ａｓｓｅｍｂｌｅｄｃｏｒｅ－ｓｈｅｌｌｐｏｌｙ（１ａｃｔｉｄｅ－ＣＯ—ｇｌｙｃｏｌｉｄｅｅｔｈｙｌｅｎｅｏｘｉｄｅｆｕｍａｒａｔｅ）ｎａｎｏｐａｒｔＭｅｓ．ＰｈａｒｍＲｅｓ．２００８，２５（７）：１５５２－１５６２．［９１】许乙凯．磁共振造影剂及临床应用．１版．北京：人民卫生出版社，２００３．４３．［９２】ＭｏｇｈｉｍｉＳＭ，ＨｕｎｔｅｒＡＣ，ＭｕｒｒａｙＪＣ．Ｌｏｎｇ－ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇａｎｄｔａｒｇｅｔ－ｓｐｅｃｉｆｉｃｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ：ｔｈｅｏｒｙｔｏｐｒａｃｔｉｃｅ．ＰｈａｒｍａｃｏｌＲｅｖ．２００１．５３（２）：２８３－３ｌ８．［９３】ＡｌｌｅｍａｎｎＥ，ＧｒａｖｅｌＰ＇ＬｅｒｏｕｘｏｎＪＣ，ｅｔａ１．ＫｉｎｅｔｉｃｓｏｆｂｌｏｏｄｃｏｍｐｏｎｅｎｔａｄｓｏｒｐｔｉｏｎｏｆｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔＣ３ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｐｏｌｙ（Ｄ，Ｌ－ｌａｃｔｉｃａｃｉｄ）ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ：ｅｖｉｄｅｎｃｅｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ．ＪＢｉｏｍｅｄＭａｔｅｒＲｅｓ．１９９７．３７（２）：２２９－２３４。【９４］徐辉碧．纳米医药．１版．北京：清华大学出版社，２００４．１３６．１３９．【９５】ＨａｒａｓｈｉｍａＨ，ＳａｋａｔａＫＦｕｎａｔｏｋｅｔａ１．Ｅｎｈａｎｃｅｄｈｅｐａｔｉｃｕｐｔａｋｅｏｆｌｉｐｏｓｏｍｅｓｏｎｔｈｒｏｕｇｈｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔａｃｔｉｖａｔｉｏｎｄｅｐｅｎｄｉｎｇ１９９４，１ｔｈｅｓｉｚｅｏｆｌｉｐｏｓｏｍｅｓ．ＰｈａｒｍＲｅｓ．１（３）：４０２－４０６．【９６】张阳德．纳米药物学．北京：化学工业出版社，２００６．１１５．１２３．【９７】ＲｉｌｅｙＴ＇ＧｏｖｅｎｄｅｒＴ，Ｓｔｏｌｎｉｋａｓｐｅｃｔｓｏｆｍｉｃｅｌｌａｒ－ｌｉｋｅＳ，ｅｔａ１．ＣｏｌｌｏｉｄａｌｓｔａｂｉｌｉｔｙａｎｄｄｒｕｇｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎＰＬＡ．ＰＥＧｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ．ＣｏｌｌｏｉｄｓａｎｄＳｕｒｆａｃｅｓＢ：Ｂｉｏｉｎｔｅｒｆａｃｅｓ．１９９９，１６（１）：１４７．１５９．３４中山大学硕士学位论文［９８】徐辉碧．纳米医药．１版．北京：清华大学出版社，２００４．１３８．［９９］张阳德．纳米药物学．北京：化学工业出版社，２００６．１１４．［１ｏｏ】ＭａｃＡｄａｍＡＢ，ＳｈａｆｔＺＢ，ＪａｍｅｓＳＬ，ｅｔａ１．Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃａｎｄｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃａｌｂｕｍｉｎｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓａｎｄｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓｕｒｆａｃｅｃａｒｂｏｘｙｌｉｃａｃｉｄａｎｄａｍｉｎｏｒｅｓｉｄｕｅｓ．ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ．１９９７，１５１（１）：４７—５５．ａｓ［１０１】ＭｏｌｄａｙｏｆｃｅｌｌＲＳ，ＤｒｅｙｅｒｓｕｒｆａｃｅＷＪ，ＲｅｍｂａｕｍＡ，ｅｔａ１．Ｌａｔｅｘｓｐｈｅｒｅｓｅｌｅｃｔｒｏｎｍａｒｋｅｒｓｆｏｒｓｔｕｄｉｅｓｒｅｃｅｐｔｏｒｓｂｙｓｃａｎｎｉｎｇｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ．Ｎａｔｕｒｅ．１９７４，２４９（４５２）：８１－８２．［１０２】ＯｌｉｖｉｅｒＪＣ，Ｈｕｅｒｔａｓ凡ＬｅｅＨＪ，ｅｔａ１．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｐｅｇｙｌａｔｅｄｉｍｍｕｎｏｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ．ＰｈａｒｍＲｅｓ．２００２，１９（８）：１１３７·１１４３．［１０３］ＢａｌｔｈａｓａｒＳ，ＭｉｃｈａｅｌｉｓＫＤｉｎａｕｅｒＮ，ｅｔａ１．Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎｏｆｃａｒｒｉｅｒｓｙｓｔｅｍｆｏｒｕｐｔａｋｅｉｎａｎｔｉｂｏｄｙｍｏｄｉｆｉｅｄｇｅｌａｔｉｎｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓａｓｄｒｕｇｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ．Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ．２００５，２６（１５）：２７２３－２７３２．３５中山人学硕十学佩论文附图移藤◇Ｍ｛Ｉｄ＇４１（ｍＡ方．空同样ｐＣｎｒａ）ｂＭｏ一嘲缱方空间群ｂ３ｄ）幽Ｉ－１。Ｍ４１Ｓ系列中孔结构巨ｃＭＯ＾＇３０候状空间群Ｄ２）圈３－２＋加入Ｔｗｅｅｎ后的钆纳米造影剂ＨＲＴＥＭ电镜扫描凹（×１０６）图３．３水Ｇｄ－ＭＣＭ．４１的能谱图３ｌ∞０００参一２０００００００１２３４５６７８２０图３－４奉无Ｇｄ的ＭＣＭ．４１的ＸＲＤ小角衍射谱图３７中山人学硕＋学何论文苫’历Ｃ盟Ｅ００３６９２０图３．５＋Ｇｄ－ＭＣＭ．４１的ＸＲＤ小角衍射谱图备兽里｝Ｃ２０００００ＯＯ３６９２０图３．６幸ＸＲＤ小角衍射谱图ａ：ＭＣＭ－４１：ｂ：Ｇｄ－ＭＣＭ．４１３８中山人学硕十学位论文各‘历Ｃ旦Ｃ，００４０图３．７拳无Ｇｄ的ＭＣＭ．４１的ＸＲＤ广角衍射谱图五。荔Ｃ旦三４０图３．８串Ｇｄ－ＭＣＭ．４１的ＸＲＤ广角衍射谱图３９中山人学颂十学位论文粤ｒ恻３－９＂不同样晶ｎ．。２曲线：ａ）Ｇｄ－ＤＴＰＡ：ｂ）Ｇｄ－ＭＣＭ－４１：ｃ）Ｔｗｉｎ分肚的Ｇｄ—ＭＣＭ一４Ｈ３．１０含钆纳米材料Ｇｄ－ＭＣＭ．４１和Ｇｄ－ＤＴＰＡ体外ＭＩＬｌ扫描剖面舢珊瑚㈣。划３．１ｌ静脉注射造影帮］Ｇｄ－ＭＣＭ一４１（１６｝Ｌｍｏ［Ｇ机ｇ）前后小鼠主动脉ＭＲＩ信号强度变化垂一＆删ｔｉｍｅ／ｍｉｎ中山大学硕士学位论文国３－１２正常裸鼠尾静脉注射１６９ｌａｄＧｄ／ｋ￥的Ｇｄ－ＭＣＭ４Ｉ（Ａ－Ｂ）悬浮液或Ｇｄ－ＤＴＰＡ（Ｃ－Ｄ）前后ＭＲ圈Ｆｉｇ．３－１２ＭＲｉｍａｇｅｓｏｆｎｏｒｍａＪｎｕｄｅｍｉｃｅｂｅｆｏｒｅｏｒａｆｔｅｒｖｅｎｏｕｓ画ｅｃｔｉｏｎｏｆＧｄ－ＭＣＭ４１（０．０１６帅Ⅳｋｇ；Ａ－Ｂ）ａｎｄＧｄ－ＤＴＰＡ（００１６ｒａｔａｏｌ／ｌ‘ｇＣ－Ｄ）ＩＩ血萨ｓｓｈｏｗｎａｍｂｅｆｏｒｅ岫ｅｃｔｉ（ｍ（＾ｃ）ａｎｄ３０ｍｉｎｐｏｓｔ缸ｊｅｃｔｌｏｎ（Ｂ，Ｄ）］ｈｅａｏ啦（ｗｈｉｔｅａⅡｏｗ）ａｎｄｌｉｖｅｗ∽ｓｉ铲ｉｆｉｃａａｄｙｅｎｂａｎｃｍｉｍⅡｉｎｔｒａｖｅａｏｖｓａｄｍｉｎｉｓｗａｄｏｎｏｆＧｄ－ＭＣＭ－４１ｒｍｏｌ，：ｃｇ；Ａ－Ｂ），ｃｏｑ“ｔｏａｌｍｏｓｔⅡ０ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔｗｉｔｈＧｄ－ＤＴＰＡｍ０１６围３－１３鼻咽癌Ｌ＇ＮＢ２裸鼠移植瞎尾静脉注射０．０１６ｍｍｏ垤ｇＧｄ＆ｇ的Ｇｄ－ＭＣＭ－４１（Ａ－Ｂ）悬浮液或Ｇｄ－ＤＴＰＡ（Ｃ．Ｄ）前后ＭＲ图Ｆｉｇ３－１３ＭＲｉｍａｇｅｓｏｆＮｔＣＣＮＥ·２ｘｅｎｏｇｒａｌｌｅｄｔⅢｈ∞ｉｎｎｕｄｅｍｉｃｅｂｅｆｏｚｅｏｒ船ｖｅｎ吣画ｅｃｔｉｏｎｏｆＧｄ－ＭＣＭ－４１（００１６ｍｒｎｏｌ几ｇ；Ａ·Ｂ）ａｎｄＧｄ－ＤＴＰＡ（００１６ｍｍｏｔ／ｋ《Ｃ－Ｄ１Ｉｍａｇｅｓ‰＂ａｒｅｂｅｆｏｒｅｉ．ｊｅｃｆｉｏｅ（Ａ．Ｃ）ａｎｄｌ５ｒａｉｎｐｏｓｔｉｎｊｅｃｔｌｏｎ（Ｂ．Ｄ）ＴｈｅＣＮＥ－２ｘｅｎｏｇｒａｆｔｅｄｔｏ，ｌｏｔｗａｓｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｃｏｎｓｉｄｅｎｂｌｙｄｍｍ∞目ｎ∞ｔｏｌｌＭＲｉｍａｇｅｓａｆＬｅｒｉ咖”舯ｌｌｓａｄｍｉｎｌｓｔｒａｔｉｏｍｏｆＧｄ－ＭＣＭ－４１（０．０１６ｍｍｎ咄女＾一ｌ轨ｃ∞邱ｄｒ捌如ａｌｍｏｓｌ丑。即ｈａｎｃＨｌｌ铷ｒ埘ｍＧｄ－ＤＴＭ中山大学硕士学位论文中山分大学测试析报告中心；＝≈２自＝＝专＝＝＝＝＝≈＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝；＝＝＝＝来样单位，物理科学与工程技术’Ｚ院样品原标识：含ｃｄ溶液来样日期，２０１０．０５．０４样品外观；无色溶液坌堑垄垦！型ｌ塾！一捡塑９ｌ２报告日期；２０１０．０５．０７曩试悝用便嚣Ｉ全潜直谚簪焉子体贩子笈射九涝仪．ＩＲＩＳＡｄｙａｎｔａｇｅＯｌｉｌ）（夔田ｎｌ∞加Ｊ啪¨＾ＩｈＣ。７ｐ丌吐蛔）绪星（ｒａｇ／Ｌ）ｃｄ（钆）束检出（＜０．衢）丰撩出（（ａ。５）幸捡出（＜ｎ０５）老＿睦出（（ｏ．∞）编号／元素３４——————————————————————————————————一注。ｌ，本分析报告仅对送检样品负责．２、分析编号ｔ２０１００５０８图３一１４体外纳米材料处理液及小鼠体内血液处理液钆元素检测结果４２中ｕ１人学硕ｔ学什论立毹抟嚣幽３．１６蟥高卉ｕ耸组小鼠肿组纵ｌ｜Ｊ见空泡样监（ＨＥｘ２００）变性（箭头）（ＨＥｘ２００）蚓３．１５品高荆耸纽小酸肺组织水肿样瀛．幽３．１７虽高剂址纽小鼠肾小符Ｅ皮细胞胞浆稀疏（ＨＥｘ２００）藏一图３＂１８黯高斛鼙组小鼠肺动脉内血栓形成（ＨＥｘ２００）幽３．１９疆高刺茸组小鼠心腔内ｍ栓形成（ＨＥｘ２００）俐３．２０最高刺培组小鼠脾脏形态学术地异常（ＨＥ×２００）：！ｉ二兰堕芏！！堡！幽３－２Ｉ昂高剂培组小鼠脑纽蜕形态学术见异常（ＩＩＥ．ｃ２００）瓣戆灞簿弛异常（ＨＥｘ２００）址异常（ＨＥｘ２００见异常（ＨＥ，＝２００）一一一一——创３－２２蛙低荆鞋组小鼠肺暂１纵｝ｆ三志学术嘲３－２３蛀低刑艟纽小鼠肘纽数形态学术嘲３－２４最低利鼙纽小鼠肾纽织形态学术见异常（１皿ｘ２００）留３－２５最低荆墙组小鼠心脏组织形志学术魁异常（ＨＥ，一２００）蚓３·２６培低剂坫组小鼠脾观纸形态学术中山人学硕十学位论文幽３，２７域低剥颦组小鼠脑组双形态学束地异常（ＨＥ×２００）嘲３＋２８给药鲲小鼠肝组织标本ＣＤ６８免疫目３－２９对照组小鼠肝组织ＣＤ６８免疫组绒化学染色ＳＰ（ｘ２００）组织化学染色ＳＰ（×２００）中山人学硕ｔ学何论文肝脾肺鼻咽癌移植瘤国３．，０给药后４小时小鼠器官及肿瘤纽织电镜图（ａ）ｍ幽４－１２纳米粒表面ＰＥＧ密度对调理作刚的影响（ａ）ＰＥＧ密度较低时，易技生调理作用；（ｂ）ＰＥＧ密度较高时，不易发生调理怍刖注ｔ嗤３—１＋、幽３－２＋、幽３－３’、目３－４＋、划３－５＋、国３．６＋、削３．７＋、凹３．８＋、蹦３－９＊２中山入学化学系李幸提供［１】引自孙永军介孔材料的研究进展山乐建筑＾学学报２００９２４（４）３６２．３６８［２１引自徐辉碧纳米医药２００４ｌ北京清华人学出版朴Ｐ１３８中山大学硕士学位论文附硕士期间发表和完成的论文录＞张永裕，刘立志，冯宇鹏，崔春艳，王金花，谢富康，邵元智，李立，．ｃ．新型磁共振造影剂介孔二氧化硅钆掺合纳米颗粒的研制，中山大学学报（医学科学版），已接收。＞刘冬英，吴海鹰事，张力，梁颖，张永裕，刘婷智．口服长春瑞滨联合顺铂与静推长春瑞滨联合顺铂治疗局部晚期或转移的非小细胞肺癌的ＩＩ期临床研究，中国肿瘤临床，已接收。参与的国家级科研基金课题：＞《含钆纳米材料磁共振分子影像造影剂的研制》（国家自然科学基金）《鼻咽癌ＭＲ分期和分子影像学研究》（８６３计划重大项目子课题）＞４７中山大学硕士学位论文致谢光阴荏苒，岁月如梭。在中山大学肿瘤防治中心三年的学习生活中，我得到了无数的帮助和支持。在此，表达我内心深深的感激之情。首先，特别感谢我的恩师李立教授三年来在我学业上谆谆不倦的教诲和生活上无微不至的关怀。李老师的敏锐、执着与刻苦精神给我留下深刻印象。李老师渊博的知识，精湛的学术造诣，孜孜不倦的敬业精神，实事求是的科学态度，严谨务实的治学作风令我从不敢松懈对科研及工作的追求，从不放弃对美好未来的向往，让我深深体会到“天道酬勤”的道理，是我一生学习的榜样。同时李老师不断的激励和支持，为我投身甚至沉迷于科学研究提供着源源不断的精神动力。每当我工作、学习与生活遇上困扰，李老师耐心的教导与释疑解惑总能令我眼前一亮、卸下包袱，扬着奋斗的风帆继续向前，刚入学时，李老师的一句话至今我仍记忆犹新：“一个人，无论你将来能做出多大的成绩或成就，首先做人要正派，踏踏实实。”李老师从不同侧面影响我，令我在做人与做学问方面平衡发展、获益匪浅，在此表予诚挚的谢意！刘立志老师对我言传身教，在细处微节上给予极大帮助和借鉴。在论文写作上带我入门，在英文写作上孜孜教导，而且还是我开始科研之路的启蒙者之一。本论文的完成，凝聚了刘老师的心血。在此表予深深的感谢。中山大学物理系邵元智教授惊人的工作热情、严谨的思维方式、崇高的职业道德给我留下了深刻印象，使我深深领略到学者所应具有的风范，是我工作与学习之路上的一座灯塔，尤其在职业道德方面极大地震撼与启迪了我，使我深感愧疚的同时也立志加强修养，在此表予崇高的敬意衷心的感谢。感谢中山大学化学系李幸同学、刘桓同学在含钆纳米材料制备上付出的巨大精力，并提供了含钆纳米材料，与邵老师、李幸同学、刘桓同学关于材料制备方法及表征的交流，让我获益匪浅，填补了此方面知识的空白。感谢中山大学人解与组织胚胎学系冯宇鹏师兄在分子生物学实验、细胞培养与动物实验方面的指导和鼎力相助。感谢中山大学实验动物中心所有老师的指导与帮助。感谢中山大学药理学邱鹏新老师在药物毒性实验方面的建设性意见。感谢病理科蔡木炎师兄在病理学方面的热情帮助。感谢师姐崔春艳、李婵婵在学习、工作和生活方面的照顾与提醒，在论文写作、投稿上给我提了许多宝贵意见和建议。感谢何浩强老师、许桂晓老师、中山大学附属第二医院沈君教授、郭若泪师弟、中山大学附属第三中山大学硕士学位论文医院康庄老师等在动物磁共振扫描方面的无私帮助，甚至牺牲自己的休息时间，为我提供宝贵的第一手资料。感谢师妹王金花在我时问紧张之际自告奋勇地分担工作，在我遇到困难和失意的时候，给予我及时的丌解和帮助，使我相信生活是美好的。师妹张敏、袁文欣对我工作和生活的关心。感谢谢传淼主任对我的栽培和教导，让我清晰体会自己在学习和工作方面离“认真”二字还有相当长的距离，谢主任的谆谆教导不仅长进了业务也指引了人生。感谢吕衍春老师、郑列老师、张卫东老师、张蠓老师、沈静娴师姐、阮超美老师、莫运仙老师、蔡培强师兄、张赞师姐、田丽师姐、李卉师姐、刘学文师兄、尹韶含师兄等在学习和工作上的帮助。感谢同学李建鹏、师妹耿志君对我工作的支持与帮助。感谢练小荷护士长、王瑞华、吴直琼、黄亚霞老师，洪雅、小卓子，陈组长、何浩强、钟锐、卓水清、王琰等在工作上的帮助与配合。感谢吴沛宏主任、黄金华教授、范卫君教授、赵明副教授、黄子林老师、顾仰葵老师、张亮老师、高飞师兄、李旺师兄、唐田、罗荣光、林雨标等的悉心指导，使我在临床技能、介入诊疗技术等方面打下一定基础，你们精湛的医术和高尚的医德使我受益终身。感谢介入病房陈英梅护士长及全体护士的关怀和帮助，感谢手术室的老师们一直以来对我工作的支持和帮助。吴主任对学科发展的深刻认识，对工作精益求精的态度深深的影响着我。感谢超声科李安华主任对我进入肿瘤医院学习的支持和帮助，李教授严谨的作风我耳濡目染，超强的科研能力我由衷敬佩，是我人生与工作之路上的楷模。感谢Ｘ光室张伟章主任、伍尧泮主任、李家尧老师等对我学习和工作的指导，伍老师谨慎的业务态度及严格规范的自我要求给我留下深刻的印象。感谢孙新儒、段光锋、刘敏、张志权、周佳亮等同学在我学习和生活上的支持与帮助。感谢家人默默无闻的无私付出和全力支持，让我有充足的时间与精力投入学习中，是你们给了我前进的动力！感谢所有关心和帮助过我的入。本研究受到国家自然基金项目（编号：３０７７０６２９）、国家８６３计划项目子课题（编号：２００６ＡＡ０２Ａ４０４、２００７ＡＡ０２１９０１）、广东省科技计划项目（编号：２００７８０６０４０１０６）的部分资助，一并感谢。４９新型含钆纳米造影剂的磁共振影像分析及生物学评价

作者：

学位授予单位：

张永裕中山大学

1. 李铁福.邓英杰.杨本强.金志雄.宋小平 MRI肝靶向纳米造影剂的研究[会议论文]-20032. 黄卓亮 含芳酰胺寡聚配合物作为MRI造影剂的研究[学位论文]2009

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