液相色谱柱峰高降低和峰分叉的问题可能由以下几个原因引起:
1. 柱被污染:柱子可能受到前期样品或其他杂质的污染,导致分离效果下降和峰分叉。可以尝试使用一些洗脱剂或者重修柱。
2. 柱老化/破损:柱子可能由于使用时间过长或者操作不当而老化或者破损,导致色谱效果下降和峰分叉。可以更换新的柱子。
3. 柱温度过高:柱温度过高会导致柱内液体的挥发和背压升高,进而导致峰形不良和峰分叉。可以降低柱温度或者优化柱温控制方法。
4. 流速过高:流速过高可能导致分离不完全和峰形不良,进而出现峰分叉的问题。可以降低流速或者优化流速控制方法。
5. 样品溶解度差:样品溶解度差可能导致分离不完全和峰形不良,可以尝试调整样品的溶解度或者优化样品预处理方法。
6. 色谱条件不合适:可能是流动相的配比不合适、柱温度不合适、流速不合适等导致峰分叉。可以进行条件优化和适当调整。
需要根据具体实验条件和问题进行综合分析,逐一排查,找到导致峰高降低和峰分叉的原因,并采取相应的措施解决问题。
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