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清除超氧阴离子自由基

2024-09-02 来源:化拓教育网
清除超氧阴离子自由基

取0.05mol/L Tris-HCl缓冲液(PH8.2)5ml,置于25℃水浴中预热20min,分别加入4ml不同浓度的提取液,25℃水浴中预热20min,再加入3mmol/L25℃水浴中预热20min的邻苯三酚溶液1ml,混匀后于25℃水浴中准确反应5min,加入10mol/LHCl 1ml终止反应,于320nm处测定吸光度,空白对照组以相同体积的蒸馏水代替样品。每个试样作三个平行样,取其平均值。 实验结果以清除率E表示: E=

A空白A样品×100%

A空白A样品用相同样品浓度的空白调零,消除样品颜色的影响。

注:A空白是不加样液测一值(A0),A样品空白(Ax0)是只加样液,其他用水代替。

2.5.2.3清除羟自由基

于试管中分别加入不同浓度的提取液2ml,9mmol/L水杨酸-乙醇2ml,9mmol/L FeSO4 2ml,最后加入2ml 8.8mmol/L H2O2 启动反应,37℃反应15min,以蒸馏水为空白对照,在510nm下测量各待测液的吸光度。考虑到本身的吸光值,以9mmol/L水杨酸-乙醇2ml,9mmol/L FeSO4 2ml,蒸馏水2ml,不同浓度的样品溶液2ml为提取液的本底吸收。清除率的计算公式为:

A0(AxAx0)·OH清除率=×100%

A0式中:A0为空白对照液的吸光度,Ax为加入样品液后的吸光度,Ax0为提取液本底的吸光度。

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