发布网友 发布时间:2022-04-21 23:33
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热心网友 时间:2023-07-17 21:21
(1)RP-HPLC法测定芦荟苷
【仪器与试剂】
美国Waters501型泵,U6K进样器,美国Beckman163型可变波长紫外检测器和427型积分记录仪;紫外吸收光谱用日立557型分光光度仪测定。
乙腈:色谱纯;水:Millipore-Q过滤高纯水;三氟醋酸:Merck试剂;芦荟苷标准晶。
【色谱条件】
美国SUPELCOLC-18柱(250mm×4.6mm,5μm),柱温为室温;流动相:乙腈-0.01moL/L 三氟醋酸(22:78),流速:1.0mL/min;检测波长:359nm,检测灵敏度:0.05AUFS;进样量:10μL。
【标准曲线制备】
精密称取干燥至恒重的芦荟苷标准品适量(约12.5mg)置20mL容量瓶中,加甲醇溶至刻度、摇匀,配成0.5mg/mL的溶液;分别精密吸取上述溶液1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL,置10mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度、摇匀。进样测定吸光度。
【样品测定】
精密称取样品50mg,置50mL容量瓶中,加入甲醇45mL,超声提取30min,加甲醇溶解至刻度,充分摇匀.经0.45μm微孔滤膜过滤,取滤液按标准品测定方法进行测定,以外标法计算样品芦荟苷含量。
(2)芦荟多糖的测定
将芦荟制品样品溶于水后,在调成的80%乙醇溶液中沉淀(若液体样品可直接在80%乙醇溶液中沉淀),沉淀物用80%乙醇溶液多次洗涤,经水溶制成多糖提取液,用苯酚—硫酸显色反应进行比色分析定量;亦可将上述沉淀物用盐酸水解成D-甘露糖和D-葡萄糖,利用醛己糖在常温下与苯肼生成甘露糖腙结晶物的特性,测定生成的甘露糖腙的质量,进而计算出甘露聚糖的含量(0.233g甘露糖相当于0.35g甘露聚糖)。